明胶药用空心胶囊铬检测方法技巧指导原则-20120430-2方案研究.ppt

* 二、检测方法 《中国药典》2010年版（二部）明胶空心胶囊项下铬检查项（P1204） 取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸5~10ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波消解炉内，进行消解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并用2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法制备试剂空白溶液；另取铬单元素标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0μg的铬标准贮备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0~80ng的对照品溶液。 取供试品溶液与对照溶液，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（附录IV D第一法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。含铬不得过百万分之二（2mg/kg）。 二、检测方法—试验设备 仪器 原子吸收分光光度计（含石墨炉原子化装置） 电子天平 微波消解仪 电热板或其他赶酸设备，如：恒温消解仪、赶酸器等。 试剂 硝酸（优级纯,国药集团） 铬单元素标准溶液（1000μg/ml，国家标准物质） 二、检测方法—试验步骤 检验样品： 胶囊剂（由明胶空心胶囊壳装载的胶囊） 检验项目： 明胶空心胶囊中的铬 检验所需检品量的参考值： 胶囊规格 平均重量(g/粒，参考值) 一次实验量（粒） 检验3倍量（粒） 0# 0.093 15 45 1# 0.074 15 45 2# 0.061 20 60 3# 0.050 20 60 4# 0.038 30 90 二、检测方法—试验步骤 空心胶囊壳的制备： 参考附录I E 胶囊剂装量差异项（附录8） 具体制备方法：倾出胶囊剂的内容物，胶囊壳用棉棒或小刷试净（不得损坏囊壳），放置，待用。 胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬的测定方法： 铬标准贮备液的制备：取铬单元素标准溶液（1000μg/ml），用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0μg的铬标准贮备液(不得超过一个月)。 标准溶液的制备：分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0~80ng的对照品溶液。临用时现配。 二、检测方法—试验步骤 胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬测定方法(过夜) ： 供试品溶液的制备：精密称取本品0.5g(胶囊整体称重，如1号胶囊约7个，精密称定)，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸5~10ml，混匀，浸泡过夜，盖上内盖，旋紧外套，置适宜的微波炉内消解。消解完全后，取消解内罐置电热板上缓缓加热至红棕色蒸汽挥尽并近干(1~2mL)，用2%硝酸转移至50ml量瓶中，并加2%硝酸稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；同法制备试剂空白溶液，作为空白校正。 测定法： 取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（《中国药典》2010年版（二部）附录IV D第一法，标准曲线法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。 二、检测方法—试验步骤 胶囊剂中明胶空心胶囊壳中铬新测定方法(不过夜)： 取样品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5ml，100℃30分钟使溶解，补加硝酸2ml，加水1mL，待冷却至室温，加0.5ml氢氟酸，进行第一次微波消解（参考程序为10min升温至120℃，保持5min，10min升温至140℃，保持15min）。冷却放气（无需完全打开消解罐盖，只需扭松即可）。随后进行第二次消解（参考程序为10min升温至150℃，保持5min，10min升温至185℃，保持15min）。冷却后，加热赶酸至1~2ml， 2%硝酸溶液至50ml，作为供试品溶液。同法制备试剂空白溶液；另取铬单元标准溶液，用2%硝酸稀释制成每1ml含铬1.0ug的铬标准储备液，临用时，分别精密量取铬标准贮备液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铬0~80ng的对照品溶液。 测定法：取供试品溶液与对照品溶液适量，以石墨炉为原子化器，照原子吸收分光光度法（《中国药典》2010年版（二部）附录IV D第一法，标准曲线法），在357.9nm的波长处测定，计算，即得。 三、方法学验证 线性： 制备含铬的对照品溶液至少5份，浓度依次递增，最高浓度吸收值应在0.8以下，保证具有较好的线性范围，相关系数（r）≥0.99。检测波长： 357.9nm。 准确性： 应进行整个实验过程的（包括前处理）方法学回收率验证，暂定回收率应为80%-120%的范围内。每波次测定需进行随行回收试验，每10个样品加一个质控样品。 2ppm LOQ:0.5ppm 三、方法学验证 重复性 取限度浓度的标准品溶液重复测定5次，吸收度（测定值）的变化范围（RSD）不得过5%。 定量限（LOQ） 本方法定量限应不低于0.5mg/kg。 四、注意事项 消解：