生物化学 第二章 核酸技术知识.ppt

真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是 核小体(nucleosome)。 真核细胞核染色质中DNA双螺旋缠绕在组蛋白的八聚体上，形成核小体。许多核小体之间由DNA链相连，形成串珠状结构。在串珠状结构的基础上，再经过几个层次折叠，将DNA紧密压缩成高层次的结构——染色体。 核小体的组成 DNA：约200bp(其中146bp 的核心DNA围绕组蛋白形成左手超螺旋, 54bpDNA用于连接) 组蛋白：H1 ，H2A，H2B，H3，H4 核小体 核小体链（ 11nm，每个核小体200bp） 串珠状染色质细丝 染色质纤维 染色质单体 组蛋白与DNA的结合 DNA双螺旋 核小体链 染色质纤维 染色质细丝 染色质单体 DNA的功能 DNA的基本功能是作为遗传信息的载体，为生物遗传信息复制以及基因信息的转录提供模板。 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。 一个生物体的全部DNA序列称为基因组（genome）。 基因组的大小与生物的复杂性有关，如病毒SV40的基因组大小为5.1×103bp，大肠杆菌为5.7×106bp，人为3.2×109bp。 二、RNA的分子结构 生物细胞中的RNA包括转移RNA（tRNA）、信使RNA（mRN A）和核糖体RNA（rRNA）三类。它们的碱基组成、分子大小、生物学功能以及在细胞中的分布都有所不同，因此结构也比较复杂。 RNA 是无分支的线形多聚核糖核苷酸，分子较小，多为单链结构，少数局部形成螺旋。 四种核糖核苷酸组成，即腺嘌呤核糖核苷酸（AMP），鸟嘌呤核糖核苷酸（GMP），胞嘧啶核糖核苷酸（CMP）尿嘧啶核糖核苷酸（UMP）。 碱基组成 A、G、C、U ， 稀有碱基较多 。 碱基配对：A＝U，G≡C 戊糖：核糖。 连接方式： 3‘,5’-磷酸二酯键 RNA分子的种类较多，分子大小变化较大，功能多样化。 主要的RNA种类有rRNA、mRNA、tRNA。 RNA与DNA的差异 DNA RNA 糖 脱氧核糖 核糖 碱基 AGCT AGCU 不含稀有碱基 含稀有碱基 RNA的种类、分布、功能 线粒体RNA、叶绿体RNA和少数RNA病毒 RNA的一级结构： 各核苷酸之间的连接方式（3′-5′磷酸二酯键）和排列顺序叫做RNA的一级结构。 RNA的二级结构： RNA的多核苷酸链在某些部分弯曲折叠，形成局部双螺旋结构叫做RNA的二级结构。 RNA的三级结构： 在二级结构的基础上 进一步扭曲折叠便形成更为复杂的三级结构。 组成 RNA 的核苷酸也是以 3‘,5’-磷酸二酯键彼此连接起来的。但 RNA 分子比 DNA 分子小得多（含几十至几千个核苷酸），且不象 DNA 那样都是双螺旋结构，而是单链线形分子。天然 RNA 只有局部区域为双螺旋结构。这些双链结构是由于 RNA 单链分子通过自身回折使得互补的碱基对相遇，通过氢键结合形成反平行右手双螺旋结构，不能配对的区域形成突环，被排斥在双螺旋结构之外。以氢键和碱基堆积力为稳定因素。双螺旋区约占 RNA 分子的 50%。 （一）tRNA的分子结构 1、tRNA的一级结构 tRNA约含70-100个核苷酸残基，是分子最小的，约占全部RNA的16%；但是含有稀有碱基最多的RNA，其稀有碱基的含量可多达20%。 tRNA是单链核酸，但其分子中的某些局部也可形成双螺旋结构。 tRNA的生物功能是在蛋白质生物合成过程中转运氨基酸。细胞内tRNA的种类很多，估计有50多种。每一种氨基酸都有与其相对应的一种或几种tRNA。 tRNA 的一级结构特点： （1）相对分子质量在2.5万左右，由70～90个核苷酸组成，沉降系数在4S左右； （2）碱基组成中有较多的稀有碱基； （3）3?末端都为…CPCPAOH，用来接受活化的氨基酸，所以这个末端称为接受末端； （4）5?末端大多为PG…，也有的为PC…。 2、tRNA的二级结构 tRNA的二级结构大都呈三叶草型（如图2-23）。双螺旋区构成了叶柄，突环区好像是三叶草的三片小叶。由于双螺旋结构所占比例较高，tRNA的二级结构十分稳定。三叶草型结构由四环四臂组成。 四环四臂 四环：二氢尿嘧啶环、反密码环、 额外环 、 TψC环 四臂：氨基酸臂、二氢尿嘧啶臂、 反密码子臂、 TψC臂。 携带氨基酸 辨认