松脂基寡糖苷免疫激活剂的合成、及其抗松线虫病的活性筛选.pptVIP

Page ? * 松脂基寡糖苷免疫激活剂的合成、及其抗松线虫病的活性筛选 项目研究意义松材线虫病 病原：嗜木伞真滑刃线虫(Bursaphelenchus xylophilus) 主要传播媒介：松墨天牛(Monochamus alternatus) 寄主：赤松、黑松、马尾松、黄松、南欧海松等松属植物 特点：传播蔓延迅速，防治难度极大，被称为“松树癌症”、“无烟的森林火灾” 现状：1982年发生该病后疫区范围扩大到江苏、浙江、安徽、福建、江西、山东、湖北、湖南、广东、广西、四川、重庆、贵州、云南等14省区市，共计致死松树5亿多株、松林30多万公顷 ，造成经济损失上千亿元，在我国属于二级检疫对象。 松材线虫病防治的形势十分严峻！！！ 松线虫病致病机理 1、松材线虫与其携带的致病细菌共同侵入寄主，在松材线虫提供保护和营养的条件下，由致病细菌分泌毒素导致寄主的萎蔫和死亡。 2、松线虫即从天牛咬食的树皮伤口处侵入树体内，侵染后可破坏树脂道薄壁，受害木质部射线薄壁细胞的死亡，导致输水堵塞，蒸腾作用降低，脱水枯死。 图示为受损的树脂管 本项目研究目标 依据松线虫的致病机理、松科植物免疫机制，探求预防、治愈松线虫病的可行性方法； 筛选出若干种单体抗原活性较强的寡糖分子； 研究松香树脂衍生物的合成工艺、提纯方法； 在以上综合研究基础上，开发出松科植物免疫激活剂，建立预防、治愈松线虫病的新方法。 药物分子设计 灭菌 杀虫 免疫激活 疏通树脂管道 苷元酚羟基 灭菌作用 糖元激发植株免疫系统，产生并积累抗病物质， 表面活性剂性质，冲散聚集在树脂管中松线虫，疏通树脂管 破坏致病菌和松线虫共生关系，抑制松线虫生长繁殖，致松线虫死亡 补骨脂素 项目研究内容，研究方案和研究进度 1）由去氢枞酸为原料合成去氢枞酸酚类衍生物-1,2,3,4,4a, 9,10,10a-八氢-4，6-二羟基-7-异丙基-1，4a-二甲基菲-1-羧酸。 项目研究内容，研究方案和研究进度 2）对多种具有强抗原活性的寡糖分子的研究。尝试以脱氢枞酸二元酚衍生物作为苷元，以具抗原活性的低分子量的寡糖分子作为糖元，合成糖苷 。采用寡聚酸、低聚异麦芽糖、果寡糖、低聚甘露糖、 牛蒡寡糖、葡聚七糖、木寡糖、壳聚糖。 3）以去氢枞酸酚衍生物为苷元、寡糖分子为糖元合成糖苷，分离纯化，以NMR、UV、MS等物化手段确认。 4）对不同糖原分子合成糖苷的生物活性、毒理学进行研究。检测的糖苷进行药效试验触杀实验、田间药效试验，实验室触杀实验采用线虫悬浮液+农药直接触杀法。计算线虫校正死亡率在50％时的糖苷处理质量浓度。以LC50、线虫校正死亡率等毒理学、药理学数据和已感染松线虫病松科植物恢复健康周期为指标，综合考察实验数据。 项目研究内容，研究方案和研究进度 麦芽糖 纤维二糖 进度安排 2013.3-2013.5：松线虫病疫区采集松线虫、患病松科植物树脂管切片样本，依据松线虫病的致病机理和松科植物的免疫机制，探求预防、治愈松线虫病的新方法。 2013.6-2013.12：研究松香衍生物的药效性质，选出理化性质最稳定、药效作用最明显的苷元，并研究其最优合成工艺。 2014.3-2014.6：研究寡糖抗原活性，筛选出活性较强价格低廉的糖元分子。 2014.7-2014.11：对合成出的糖苷进行药效试验、毒理学试验、大田示范试验。收集试验数据。 2015.3-2015.6：整理试验数据，药效最为显著的糖苷。 2015.8-2016.3：糖苷分离提纯，研究药效活性。 取得的成果 杀菌活性与小鼠口吸急性毒性个体差异明显，壳聚糖苷表现最好的杀菌活性与最低的毒性；杀虫活性毒性个体差异不明显，1h LC50为19.2 至34.2mg/L，与联苯菊酯、吡虫啉近似，木二糖表现最好的杀虫活性。 22种农药对松材线虫半致死浓度 1 h, C(mg . L-I) 乐果 1818.0 辛硫磷 201.0 乙酰甲胺磷 1210.0 敌敌畏 320.0 灭幼脲三号 625.0 抑太保 2.5 噻嗪酮 956.0 单甲脒 889.0 卡死克 5.1 扫螨净 10.1 阿维菌素 4.5 甲维盐 0.3 三唑锡 1256.0 溴氰菊酯 4.2 氯氟菊酯 7.5 联苯菊酯 16.7 杀螟丹 53.0 涕灭威 752.0 杀虫双 1811.0 锐劲特 6250.0 吡虫啉 25.2 苦参碱 1.2 脱氢松香酸羟基衍生物的糖苷的生物活