菌种生产教学教案.ppt

三、培养基的灭菌 （一）母种培养基的灭菌  无菌检验约30℃条件下→空白培养2~3天 灭菌与摆斜面 摆斜面 1kg/cm2(103kpa、121℃） 20~30min 返回本节 母基灭菌与摆斜面 返回本节 （二）原种、栽培种培养基的灭菌 高压灭菌 1.5kg/cm2（152kpa、128.1℃）灭菌1~2h 返回本节 常压灭菌 100℃灭菌10h左右→再闷12h 要求 攻头、控中、保尾 返回本节 第四节 菌种的接种 一、无菌操作 二、母种的接种 (一）分离法 1.组织分离 2.孢子分离（二）转管法 三、原种、栽培种的接种 返回本章 概念：菌种移至新培养基上的过程关键：无菌操作 接种 在严格消毒灭菌条件下进行的操作 概念 一、无菌操作 接种环境消毒灭菌 酒精棉球消毒双手 开启的管口、瓶口靠近灯焰 拔出的棉塞勿触及任何地方 动作快，接种时间勿太长 要点 必备 返回本节 返回本节 特点 简便，易成功 保持原菌种性状 重复多易退化 不适于耳类 1.组织分离 组织 PDA 次生菌丝 培养 （一）分离法 步骤 返回本节 步骤 选种菇 外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、第1~2茬的子实体 取接 组织 纵剖（撕）菇体尖头镊取柄盖交界处绿豆粒大的组织放入新斜面中部 种菇 消毒 用燃烧的酒精棉球迅速擦拭 返回本节 2.孢子分离(有性繁殖） 孢子特点 菌龄小生命力强变异率高 孢 子分离法 难度较大 单孢分离 多孢分离 较简易 单孢分离的菌落 返回本节 多孢分离 概念 使许多孢子在同一培养基上，萌发后自由交配成次生菌丝的方法 步骤 种菇消毒 采收孢子 接种孢子 整菇插种法钩悬法孢子印法 返回本节 1.种菇 消毒 菌柄去2/3 苞被 有：75%酒精棉球擦 0.25%新洁尔灭浸2~3min无菌纱布吸干表面水分 无 返回本节 2.采收孢子 整菇插种法 种菇插在孢子收集器中使孢子散落于培养皿内的方法 用前灭菌 25℃、24h现孢子粉取出分离材料培养皿盖严 返回本节 钩悬法 25℃、24h现孢子粉取出分离材料 返回本节 孢子印法 返回本节 接种孢子 用接种环蘸孢子液或孢子粉涂布于平板上 返回本节 返回本节 （二）转管法 注意 种块勿太大 原老种块勿再接入 传代次数勿太多 将母种移入新的过程 概念 过程 接种环取绿豆粒大母种移入新斜面中部 返回本节 转管 返回本节 三、原种、栽培种的接种 接原种 用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中料面上 返回本节 返回本节 接栽 培种 用接种匙（镊、铲）取枣大原种 放于袋的两端或瓶中料面上 表面老菌丝及老种块勿接入 返回本节 栽培种接种 返回本节 第五节 菌种培养与质量鉴定 一、菌种培养 （一）培养条件（二）技术环节 二、菌种质量鉴定 （一）母种质量鉴定（二）原种和栽培种质量鉴定 返回本章 一、制培养基设备（一）原料处理设备 切片粉碎两用机 切片粉碎两用机 铡草机 粉碎机 返回本节 拌料机 返回本节 装袋机 （二）培养基分装设备 返回本节 装瓶机 挖瓶机 返回本节 菌种袋 颈圈 返回本节 菌种瓶 返回本节 二、灭菌设备 高压锅 外锅：装水内锅：装物（有壁管） 锅盖 安全阀排气阀压力表 返回本节 常压 返回本节 密闭性好 要求 1. 接 种 箱 用法 清洁、放物品→ 消毒 喷雾熏蒸紫外灯 特点 简易、利移动对人体低害效果好、工效低  三、接种设备（一）接种环境 返回本节 观察窗 紫外灯 操作孔 接种箱 返回本节  2.接种室 缓冲间：2~3m2接种间：5~6m2 面积7~9m2 高2.2~2.5m 要求 6个面平滑两门错开、平拉式顶装紫外灯 清洁→物品放缓冲间→消毒 →移物至接种间→ 喷消毒液 → 10min 后接种→消毒液清洁 使用 返回本节 返回本节 返回本节 使一定工作区达到相对无菌、无尘状态的电器 3.超净工作台 双人 单人 返回本节 要求:前端为导热性好的金属材料 枪 匙 钩 铲 镊 耙 针 环 接种 4.接种工具 返回本节 固体菌种接种枪 液体菌种接种枪 返回本节 四、菌种培养没备 1.培养箱培养少量菌种的恒温电器（20~40℃） 返回本节 2.培养室培养大量菌种的恒温房 要求 光线暗密闭好、通风性强能升温、降温（空调机）有培养架 返回本节 贮 藏 室 远离污染源 低温（4~8℃） 干燥、通风、遮光 用前要严格消毒杀虫 地面常撒石灰粉 保藏原种、栽培种： 五、菌种保藏设备保藏母种：冰箱（4℃）左右 返回本节 六、菌种厂的布局根据菌种生产流程合理设置 仓库 配料室 灭菌室 接种室 培养室 办公室 栽培棚 门口 晒料场 返回本节