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山东省临床检验中心 2011年临床微生物检验（室间）质量评价活动须知 2011年山东省临检中心在全省范围内开展两次室间质量评价活动。现将临床微生物室间质量评价活动日期及有关注意事项要求如下。 细菌质评活动日期、标本批号及来源： 第一次EQA活动 检测日期：3月7-11 日 上报截止日期：3月21日 编号 临床诊断 标本 年龄 性别 试验说明 3011（5011） 胸膜炎伴胸腔积液，每次室间质评活动请在规定时间内上报检测结果，不接收书面回报结果。 三、评价项目与评分标准 1、 评价项目：细菌分离鉴定和药敏试验。 2、 评分标准：按PT方案进行评价，细菌鉴定结果评分，细菌鉴定每次正确平均每株20分，全部正确100分（极少数难鉴定菌到属水平，也给部分成绩）。药敏试验采取部分抗生素测试结果记分，评分标准同细菌鉴定。 3、年终评价：每次评价细菌鉴定和药敏试验PT得分大于或等于80者，为评价合格。 临床微生物药敏试验室内质控要求 1、药敏试验质控，按美国NCCLS规定： （1）药敏试验质控菌株应与临床标本菌按标准方法同步进行接种分离。 （2）更换药物或培养基时必须用相应的质控菌株测试； （3）所有质控菌株在实行常规监控（一周一次质控）前应连续监测30天。对每种药、每种菌，30次试验失控结果不能超过3个。如果30天监控结果完全符合上述要求，可转为一周一次质控的方法。只要抑菌坏直径超出可接收范围都必须校正。当失控原因不明时，可用相应质控菌株连续监测5天；每种菌对质控中每种抗菌药物同时测试5个抑菌环，如果结果全部达到可接收范围，可恢复一周一次质控。 2、质控菌株的保存 （1）使用中的质控菌应贮存在胰大豆琼脂（非苛养菌）或营养丰富的巧可力琼脂斜面（苛养菌），4—8℃保存，每周传代一次。 （2）长期贮存，可用5%小牛血清肉汤，10%胰大豆肉汤，10%-15％甘油，脱纤维羊血或脱脂牛奶，于—20℃甚至更低温度保存，应以不明显改变菌株原有的抗菌谱为标准。 （3）每次使用前应把菌株传代到相应的平皿上使其获得单个菌落。 3、 抗菌药物纸片的保存 密封包装置于-20℃以下低温或超低温保存。常规使用纸片可从低温取出一周用量。 　　4、接种菌液浓度准备（需氧菌或兼性厌氧菌） 纸片扩散法：过夜培养的质控菌用生理盐水配制成0.5麦氏单位，菌量约1×108cfu/mL。 稀释法：将菌液配制成108用多头接种器或加样器在每一浓度梯度的肉汤或琼脂中加入菌悬液，使最终浓度达到：肉汤稀释法为105/mL，琼脂稀释法为104/点。 5、贴抗菌药物纸片：每两个纸片中心距离不少于24mm，纸片一旦贴在某一位置上，不应再变动位置，贴完纸片的平皿15分钟后再置35℃孵箱培养16-24小时。 6、读数：用游标卡尺测量抑菌环直径，手持培养皿于黑色背景上方约几英寸，采用反射光照明，利奈唑烷、苯唑西林、万古霉素应采用透射光观测。抑菌环的边缘应为显示不明显但肉眼可见的生长处。对于不明显的生长，只有借助放大镜才能观察到的被抑制生长的抑菌环边缘应忽略不计。对于甲氧苄啶、磺胺类、颉抗剂，允许有一些轻微的生长；对于氨苄西林、利奈唑烷或万古霉素，任何抑菌环内的生长均表明其耐药；变形杆菌迁徙生长使抑菌环内生长的薄层菌可忽略不计。 7、室内质控要求一周测一次，室内质控记录表要求填写连续检测5次的结果，现场检查实验室时作为必查项目。 2011年细菌质控品内装：室间质评菌种10支（0511-0515 5支、0521-0525 5支 ）； 室内质控3支标准菌株（大肠埃希氏菌 ATCC 25922 、金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 、铜绿假单胞菌 ATCC 27853 ）共计13支/包。 请根据山东省临床检验中心网上须知认真核对质控品，如有不符请填写《2011年山东省室间质控品补寄申请表》（申请表请浏览山东省临床检验中心网站）后反馈省临床检验中心，以便补寄。 联系人 陈国建 联系电话：0531 传真：0531 e-mlail：sdccl@21 山东省临床检验中心 2011年2月22日 1