基因扩增实验室建设及生物安全.ppt

基因扩增实验室建设及生物安全 杨志军 PCR实验室示意图 PCR实验室的分区 一区：试剂准备 二区：标本处理 三区：样品扩增 四区：产物分析 每个区域都要有专用的设备及配套用品，其目的就是防止污染，保证检测结果的准确性 通用实验室配置 一区： 离心机 1台 振荡器 1台 移液器 1套 超净工作台（或防污染罩） 1台 可移动式紫外灯 1台 冰箱、耗材及专用办公用品 通用实验室配置 二区： 高速（低温）离心机 1台 振荡器 1台 移液器 1套 生物安全柜 1台 可移动式紫外灯 1台 水浴箱 1台 冰箱、耗材及专用办公用品 通用实验室配置 三区： 全自动荧光定量PCR扩增仪 1台 可移动式紫外灯 1台 移液器 1套 耗材及专用办公用品 整个检测过程中扩增产物都在密闭的扩增管中，因此三区和四区可以合并成一个区 基因扩增实验室的生物安全要求 标本处理区达到二级生物安全过实验室标准 由于基因扩增的灵敏度极高，为了避免可能出现的交叉污染，最好选用B2型生物安全柜 基因扩增实验室不仅要有无菌的概念，还要有无基因的概念 实验室生物安全的概念 避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施 人员保护 环境保护 综合措施 防护屏障 一级防护屏障：实验室生物安全柜和个人防护装备等构成的防护屏障 二级防护屏障：实验室的设施结构和通风系统等构成的防护屏障 生物安全实验室的分级 BSL-2实验室的设施和设备要求（1） 无需特殊选址，普通建筑物即可，但应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计 每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处 在实验室门口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置 实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑、不得铺设地毯 BSL-2实验室的设施和设备要求（2） 实验台面应防水，耐腐蚀、耐热 实验室的柜橱和实验台应牢固。柜橱、实验台彼此之间应保持一定距离，以便于清洁 实验室如有可开启的窗户，应设置防虫纱窗 实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光 应有适当的消毒设备 BSL-2实验室的设施和设备要求（3） 实验室的门应带锁并可自动关闭。实验室的门应有可视窗 应有足够的存贮空间排放物品以方便使用。在实验室工作区域外还应当有供长期使用的存储空间 在实验室内应使用专门的工作服，应戴乳胶手套 在实验室的工作区域外应有存放个人衣物的条件 BSL-2实验室的设施和设备要求（4） 在实验室所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求 应在实验室内配备生物安全柜 应设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置 应通风，新建实验室应采用机械通风 BSL-2实验室的设施和设备要求（5） 有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源 实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识 BSL-2实验室的主要技术指标 洁净度等级：无要求 最小换气次数：可开窗 负压差：无要求 温度：18-27℃ 相对湿度：30-70% 噪声：不超过60dB(A) 最低照度：300lx 实验室满足的技术指标（建筑装饰） 墙面、顶棚材料应易于清洁消毒、耐腐蚀、不起尘、不开裂、光滑防水，表面涂层具有抗静电性能 地面采用无缝防滑耐腐蚀材料，踢脚板与墙面齐平，相交位置做半径不小于30mm的圆弧处理 门和内墙上设有观察窗，方便观察实验室情况 采用挡鼠板和密封条，可以防虫防鼠 实验室门可以自动关闭，检修口设在缓冲区 实验室满足的技术指标（空调、通风和净化） 采用全新风系统，送、排风支管均安装气密阀门 送风系统采用粗、中、高三级空气过滤，新风口处具有防雨、防虫、防鼠、防绒毛的保护网 排风风机与送风风机连锁，排风先于送风开启，后于送风关闭 必须设置室内排风口，不得只利用生物安全柜或其它负压隔离装置作为房间排风出口 操作过程中可能产生污染的设备必须设置局部负压排风装置，并带有高效空气过滤器 实验室满足的技术条件（电气和自控） 设有专用配电箱和漏电检测报警装置，接地电阻小于1欧姆，配电管线采用金属管 实验室入口有实验室工作状态的灯光讯号显示，并设有紧急发光疏散指示标志 在缓冲区显示自控参数，在压差超过设定范围时可以发出声光报警 实验室留有电话和宽带接口，可以连接电话、传真机和电脑，方便的将实验资料传出实验室 实验室满足的技术条件（消防） 防火设计符合《建筑设计防火规范》GBJ16和《建筑灭火器配置设计规范》GBJ140等相关国