实验六.LDH同工酶的电泳分离.pptVIP

人体心,肝和骨骼肌LDH同工酶谱 组织器官 LDH1 LDH2 LDH3 LDH4 LDH5 （ 占总 LDH活性的百分比） 心 35~70 28~45 2~16 0~6 0~5 肝 0~8 2~10 3~33 6~27 30~8 骨骼肌 1~10 4~18 8~38 9~36 40~97 正常血清 27.1±2.8 34.7 ± 4.3 20.9 ± 2.4 11.7 ± 3.3 5.7 ± 2.9 * * ? 来源于同一个体或组织，能催化同一反应，而蛋白结构不同的酶称为同工酶(isoenzyme) 。同工酶的蛋白结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。因此可用电泳或其它方法将它们分离开。 乳酸脱氢酶同工酶的电泳分离 一、实验原理 乳酸脱氢酶（LDH）同工酶，它们都能催化乳酸脱氢产生丙酮酸，经电泳分离后，就有 5 个同工酶区带。本实验用琼脂糖凝胶电泳法分离人血清乳酸脱氢酶 5 种同工酶（LDH1、 LDH2、 LDH3、 LDH4、 LDH5）。 H H H H H H H M H H M M H M M M M M M M LDH1 (H4) LDH2 (H3M) LDH3 (H2M2) LDH4 (HM3) LDH5 (M4) 乳酸脱氢酶的同工酶 乳酸脱氢酶(LDH1～ LDH5) 1 2 3 4 5 酶活性 迁移位置 酶活性 迁移位置 a b (a) LDH同工酶电泳图谱 (b) （a）正常人LDH同工酶电泳图谱,（b）心肌梗塞病人血清LDH同工酶电泳图谱 1 2 3 4 5 *生理及临床意义 在代谢调节上起着重要的作用； 用于解释发育过程中阶段特有的代谢特征； 同工酶谱的改变有助于对疾病的诊断； 同工酶可以作为遗传标志，用于遗传分析研究。 心肌梗死和肝病病人血清LDH同工酶谱的变化 1 酶活性 心肌梗死酶谱 正常酶谱 肝病酶谱 2 3 4 5 + NAD+ LDH + NADH?H+ NADH?H+ + PMS NAD+ + PMS?H2 PMS?H2 + NBT PMS + NBT?H2 蓝色化合物 当 LDH 同工酶区带在琼脂糖凝胶板上分开后，给NAD+, 底物（乳酸）、PMS 和 NBT，同工酶区带即呈蓝紫色。 *