fam172a在甲状腺乳头状癌发病中的作用初步分析 word格式.docxVIP

FAM172A 在甲状腺乳头状癌发病中的作用初步研究摘要第一部分FAM172A 在甲状腺乳头状癌组织中的表达目的 研究 FAM172A 在甲状腺乳头状癌组织中的表达。方法 1）运用免疫组化方法观察 FAM172A 在甲状腺腺瘤旁正常组织、甲状腺腺 瘤及甲状腺乳头状癌组织中的表达情况。2）运用 Western blot 在蛋白水平观察 FAM172A 在甲状腺腺瘤旁正常组织，甲状腺腺瘤及甲状腺乳头状癌组织中的表 达情况。结果 免疫组化及 Western blot 技术研究发现 FAM172A 在甲状腺乳头状癌组织中 的表达明显高于正常甲状腺和甲状腺腺瘤组织，而且 FAM172A 在同一患者的甲 状腺乳头状癌组织中的表达也明显高于其癌旁组织。结论 FAM172A 在甲状腺乳头状癌组织中高表达。关键词 FAM172A；人甲状腺乳头状癌；人甲状腺腺瘤；蛋白表达第二部分FAM172A 通过 p38 MAPK 信号通路促进甲状腺乳头状 癌细胞增殖目的 研究新蛋白 FAMl72A 对人甲状腺乳头状癌细胞 IHH-4 增殖的影响及其机 制。方法 1）以前期研究工作中所构建的 PDC315-FAMl72A 质粒用脂质体 2000 转染 IHH-4 细胞，同时用 PDC315 质粒作为对照转染 IHH-4 细胞。2）用 MTT 法和细 胞生长曲线法观察过表达 FAMl72A 基因对 IHH-4 细胞增殖的影响。3）应用 Western blot 技术对几个较常见的参与细胞增殖的通路包括 PI3K、AMPK、p38 MAPK 信号通路进行筛选，对筛选出的信号通路进一步验证研究。结果 1）与转染 PDC315 质粒的 IHH-4 细胞相比，MTT 法显示 PDC315-FAMl72A质 粒 转 染 使 细 胞 增 殖 增 加 约 18 ％（ 24 小时 ）。 细 胞 生 长 曲 线 法 显 示 PDC315-FAM172A 转染组（24、48、72、96 小时）较对照组细胞生长速度更快。 2）过表达 FAM172A 可以激活 IHH-4 细胞内 p38 MAPK 信号通路。3）FAM172A 激活 p38 MAPK 信号通路可被 p38 MAPK 抑制剂 SB202190 阻断，同时 FAM172A 对 IHH-4 细胞的增殖作用也可被 SB202190 明显抑制。结论 1）FAMl72A 蛋白促进 IHH-4 细胞增殖，提示 FAMl72A 蛋白的生理功能之 一是参与细胞生长的调控。2）FAM172A 蛋白可能通过激活 p38 MAPK 信号通 路参与甲状腺乳头状癌细胞增殖调控。关键词 FAM172A；p38 MAPK；SB202190；甲状腺乳头状癌第三部分FAM172A 对甲状腺乳头状癌裸鼠成瘤的影响目的 1）建立具有摄锝功能甲状腺乳头状癌皮下移植瘤裸鼠模型, 为研究甲状腺 乳头状癌的发病机制提供工具。2）初步研究 FAM172A 对甲状腺乳头状癌裸鼠 成瘤的影响。方法 1）取人甲状腺乳头状癌细胞系 IHH-4，以 1×107 细胞数制成 200ul 细胞悬 液接种于 9 只裸鼠（5 周龄雌性裸鼠，品系 BALB/c-nu/nu）皮下，观察成瘤时间。 并用 PET-CT 观察肿瘤大小及形态，用放射性核素发射式计算机断层（emission computed tomography, ECT ） 观 察 移 植 瘤 的 摄 锝 功 能 。 2 ） PDC315 、 PDC315-FAMl72A 质粒转染 IHH-4 细胞后，接种于 6 只裸鼠皮下，成瘤后观察 肿瘤的大小、重量及生长方式。ECT 观察裸鼠移植瘤大小及摄锝功能，Western blot 法研究 FAM172A 在肿瘤中的表达情况。结果 1）裸鼠皮下成瘤率为 100.0%（9/9），细胞接种后 1 周裸鼠皮下可以形成 肉眼可见的肿瘤，4 周时 PET-CT 观察肿瘤大小，ECT 显示腹腔注射放射性 99m 锝后 15 分钟移植瘤可以显像。2）与对照组相比，过表达 FAM172A 的 IHH-4 细 胞注射后的裸鼠成瘤更大、更重，而且肿瘤呈浸润性生长，同时裸鼠本身的体重 也明显减轻。结论 1）应用人甲状腺乳头状癌细胞系 IHH-4 成功建立甲状腺乳头状癌皮下移植瘤裸鼠模型，移植瘤具有良好的摄锝功能，为甲状腺乳头状癌发病机制的研究提供了良好的动物模型。2）FAM172A 可促进裸鼠肿瘤浸润性生长，动物水平进 一步提示 FAM172A 参与甲状腺乳头状癌的发病过程。关键词 甲状腺乳头状癌；肿瘤裸鼠模型；摄锝功能；ECT；FAM172A作者：张蓉 指导教师：李连喜Preliminary study of roles of FAM172A protein in the pathogenesis o