ferritinpic1和pic1叶绿体转化烟草的分子鉴定及生理检测 word格式.docxVIP

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2018-04-24 发布于上海
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ferritinpic1和pic1叶绿体转化烟草的分子鉴定及生理检测 word格式.docx

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ferritinpic1和pic1叶绿体转化烟草的分子鉴定及生理检测 word格式

2.5 讨论352.6 本章小结35第3 章叶绿体转化烟草功能分析363.1 引言363.2实验材料363.2.1植物材料363.2.2材料的处理363.2.3 主要试剂363.3实验方法373.3.1 总铁含量测定373.3.2亚铁含量测定373.4 结果与分析383.4.1 铁胁迫下叶绿体转化烟草和野生型烟草的表型383.4.1 总铁含量测定393.4.2 亚铁含量测定403.4讨论413.5本章小结42第4 章转基因烟草的抗逆性分析434.1引言434.2 实验材料434.2.1植物材料434.2.2 主要仪器设备与试剂434.2.3 溶液配制444.3 实验方法454.3.1 过氧化氢酶（CAT）活性的测定454.3.2 过氧化氢的变化45II4.3.3 过氧化物酶（POD）活性的测定464.3.4 超氧化物岐化酶（SOD）活性的测定474.3.5 超氧阴离子的变化484.4 结果与分析494.4.1 转基因烟草和野生型烟草超氧阴离子含量变化494.4.2 转基因烟草和野生型烟草SOD活性变化504.4.3 转基因烟草和野生型烟草过氧化氢含量变化514.4.4 转基因烟草和野生型烟草CAT 活性变化514.4.5 转基因烟草和野生型烟草POD活性变化524.5 讨论534.6 本章小结54结论55参考文献56哈尔滨师范大学硕士学位论文原创性声明63哈尔滨师范大学硕士学位论文使用授权书64攻读硕士学位期间所发表的学术论文65致谢66III摘要铁是植物生长发育所必需的微量元素，在植物体的生理代谢过程中发挥着极为重要的作用。虽然铁在地壳中的含量丰富，但生物利用度却非常低。植物缺铁会严重影响作物的产量和质量，因此植物缺铁黄化已成为世界性营养失调问题。通过研究植物对土壤中铁的活化、吸收、代谢以及积累的生理及分子机制，人们可以用现代生物学手段改变植物铁的吸收和积累模式，培育铁高效农作物新品种，增加农作物产量，改善人类铁营养状况。本研究基于已构建的ferritin-pic1和pic1叶绿体转基因烟草T1代材料，对转基因植株转运铁的能力进行了研究。主要结果如下：1.转基因烟草的遗传稳定性分析通过对T1代转化体烟草进行PCR、Southernblot、Nouthernblot和Wedternblot检测，证明外源的Ferritin-PIC1和PIC1基因能够稳定遗传给后代。2.转基因烟草转运铁能力的检测在叶片面积和鲜重相同的条件下，转基因烟草转运、利用铁能力明显优于非转基因烟草。3.烟草在铁胁迫下的生理分析从抗氧化酶等生理指标分析，转基因烟草对铁胁迫的抗性比非转基因烟草高。关键词铁转运；Ferritin-PIC1；PIC1；叶绿体转化烟草；生理分析IVAbstractIronistheessentialmicro-nutritionalelementforplantgrowthanddevelopment, whichplaysanimportantroleinthephysiologicalmechanism.Althoughironis abundantinthecrust,itsbioavailabilityinsoilisverylow.Irondeficiencywillcause thecropyieldandquality,soirondeficiencychlorosisofplantshasbecomea worldwideproblemofmalnutrition.Bystudyingthephysiologicalandmolecular mechanismsofactivation,absorption,metabolismandaccumulationoftheplantfor ironinthesoil,wecanimproveironabsorptionandaccumulationmodewithmodern biologicalmethods,cultivatenewvarietiesofcropsofefficientiron,increasecrop yields,andimprovehumanironnutritionalstatus.thisstudybasedontheT1 generationoftransplastomictobaccowith Ferritin-PIC1andPIC1genes,focusonthe capacityof transplastomic tobacco.Themain results areas follows:Geneticstabilityanalysis of transplastomic tobaccoPCRsouthernblotNorthernb