生物学第三章 细胞生物学研究方法.pptVIP

第三章 细胞生物学研究方法 第一节 细胞形态结构的观察方法 一、光学显微镜 几种显微镜观察样品的大小: （一）普通复式光学 显微镜 光学放大系统 照明系统 镜架及样品调节系统 （一）普通复式光学 显微镜 分辨率： λ ：光波长； N：介质空气=1； α ：物镜镜口角 （二）相差显微镜 通过在普通光学显微镜上增加“环状光阑”和物镜后焦面上的“相差板”来调节/改变相位差，通过光的干涉作用转换成振幅差，改变光亮。 （三）荧光显微镜 构造： 滤光片系统： 激发滤光片 阻断滤光片 专用物镜镜头 （三）荧光显微镜 激发滤光片：只许特定波长光通过 阻断滤光片：只许可见荧光通过。 （四）激光扫描共焦显微镜（LSCM） 共焦：指聚光镜与物镜同时聚焦到样品的同一点上。该点以外发出的荧光被共焦板挡住。 （一）电镜的基本知识 2.电镜的基本构造 ①电子束照明系统： 电子枪与聚光镜 ②成像系统：物镜、 中间镜与投影镜 ③真空系统： ④记录系统： （二）主要电镜制片技术 1.超薄切片技术 切片厚度40-50nm ①固定： 化学法—戊二醛、四氧化饿（饿酸） 物理法—超低温冷冻 （二）主要电镜制片技术 1.超薄切片技术