血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳1课件.pptVIP

1 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 【目的要求】 1、掌握电泳技术的一般原理和基本操作过程。 2、熟悉血清中蛋白分类以及电泳分离操作。 2 【实验原理】 1.电泳：是指带电粒子在电场中向本身所带电荷相反的电极移动的现象。 在一定pH条件下，不同的蛋白质由于具有不同的等电点而带不同性质的电荷，因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同，即它们的电泳迁移率不同。 3 电场的推动力(F) F=EQ 摩擦阻力(F’) F’=6πrηV V=EQ/(6πrη) 4 【实验原理】 2. 影响电泳迁移率的因素： 内在因素：蛋白所带净电荷的量、蛋白的大小和形状 外界因素：电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度和电渗现象 5 3.醋酸纤维素溶于有机溶剂（如：丙酮、氯仿、氯乙烯、乙酸乙酯等）后，涂抹成均匀的薄膜则成为醋酸纤维素薄膜。该膜具有均一的泡沫状的结构，厚度约为120μm，有很强的通透性，对分子移动阻力很小。该薄膜电泳具有微量、快速、简便、分辨力高，对样品无拖尾和吸附现象等优点 6 4. 经醋酸纤维素薄膜电泳可将血清蛋白按电泳速度分为5条区带，从正极端依次为清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白，经染色可计算出各蛋白质的百分含量。 7 【实验器材】 1. DYY-6C型  双稳定时电泳仪和DYY-Ⅲ型电泳槽，均为北京市六一仪器