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- 2018-05-03 发布于天津
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1.2基因工程的最基本操作程序用.ppt
基因工程的基本操作程序;基因工程培育抗虫棉的简要过程:;基因工程的基本操作程序;一、目的基因的获取;(一)从基因文库中获取目的基因;基因组DNA文库;补:原核细胞的基因结构;①不能转录为信使RNA,不能
编码蛋白质。;真核细胞的 基因结构;;;基因组文库与部分基因文库的关系;基因组文库和部分基因文库的比较;2.基因文库的构建方法;(1)鸟枪法:; 以目的基因转录成的信使RNA为模板,再反转录酶的催化下反转录成互补的单链DNA,然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA,即cDNA,从而获得所需的基因。
;(3)人工合成法:;上述三种目的基因提取的方法有何优缺点?;思考:
如何从基因文库中得到所需要的基因?;1、构建基因组DNA文库时,首先应分离细胞的
A、染色体DNA?? B、线粒体DNA
C、总mRNA?? D、tRNA ;(2)利用PCR技术扩增目的基因;(二)利用PCR技术扩增目的基因;模板DNA;;;;;; 过程:;请回答基因工程方面的有关问题:?(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。?①从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_______。?②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段
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