高效液相色谱详解-郝建涛.ppt

常见图谱分析 由于液相色谱仪在工作中受到的影响因素较多，因此出现的色谱图形也较为复杂，除与操作者的使用和仪器所处的环境有关外，还与分离柱、流动相性质、分析对象的性质、所选择的工作条件有关。现仅对与仪器性能有关的常见图谱作一粗略分析，供参考。 图 谱 分析原因 现象说明及排除 1.环境温度变化过大 2.液流不稳定或有漏液 3.在技术指标范围内 1.避开室内通风口位 置和发热或制冷源 2.观察泵的工作状态, 并查漏 3. ＜1×10-4Au 图 谱 分析原因 现象说明及排除 1.外界干扰讯号 2.输液泵柱室内有气泡 3.流通池内有气泡 1.使机壳良好接地， 排除附近干扰源 2.用“清洗”键或排 放阀排除气泡 3.拆下输入导管，大 流量冲洗池体或在 池体出口增加阻力 (接长排液导管) 漂移 1.仪器在稳定中 2.在技术指标范围内 3.柱箱升过高温后， 再处于室温工作 4.检测器工作不稳定 1.正常现象 2.属正常状态 3.将分离柱从柱箱 内取出后使用 4.元器件工作点不稳 定，修理后再使用 图 谱 分析原因 现象说明及排除 1.组份分离不佳 a.色谱柱选择有误 b.流动相不符合分析要求 c.柱后导管过长 2.波长选择不正确 3.流速过大 1.重叠峰 a.更换色谱柱 b.重新选择流动相 c.尽可能减短柱后导管长度 2.重选波长，增大组 份的吸光度差异 3.减小流量值 1．流动相已用完 2．温度控制器失控 (恒温开启条件下) 3．在工作过程添加 流动相 1.突然漂移大多为 流动相用完造成 2.检查温度控制器 3.尽可能不要在工作 时加流动相，可采用 较大的贮液瓶 图 谱 分析原因 现象说明及排除 1．放大器量程选择 过大 2．放大器无输出 3．二次仪表或检测器 失效 1.减小量程范围(若接 积分仪，可减小仪 器的满度电压值) 2. 未按起始键 3.更换失效的部件 基线无噪声 出倒峰 1.组份吸光度小于流 动相的吸光度 2.流动相在该波长的 透过率＜100% 3.输出讯号极性接反 1.属正常情况 2.选择百分透过率为 100%级别的液相 专用流 动相 3.对换二次仪表讯号 线的极性 图 谱 分析原因 现象说明及排除 1.进样器污染 2.流通池污染 3.灯源老化 4.检测器放大器失调 1.进样多次或进过浓 样品后未清洗进样 阀造成 2.清洗池体。多次进 样后未清洗池体或 久日未使用后重新 开机时易发生 3.使用时间已大于 1000小时 4.重调放大器 噪声过大 五、 HPLC在科研中的应用 天然产物提取 绿原酸标品(99.8%) 85.2%绿原酸产品 93.4%绿原酸产品 食品安全检测 盐酸克伦特罗标准品色谱图 宁阳店猪肉提取液色谱图 盐酸克伦特罗 加标实验 建立了同时测定小柴胡颗粒中环磷酸腺苷、黄芩苷和甘草酸含量的方法，色谱柱：Zorbax TC-C18柱（5 μm，150 mm × 4.6 mm），流动相：甲醇（A）：0.01MKH2PO4(B)（10：90）（0min）—A：B（10：90）（12min）—A：B（70：30）（17min）—A：B（10：90）（30min）；检测波长：250nm；流速：1.0mL/min；进样量：50uL；柱温：30℃。 药物检测 建立了一种同时测定三种氨基甲酸酯类农药（速灭威、克百威、抗蚜威）的检测方法，检测条件为：色谱柱： Agilent TC-C18（4.6mm×250mm，5um）；流动相：甲醇（A）：水（B）梯度洗脱，0到20min，从100%B到100%A；检测波长：0-17min，258nm；17-18min，276nm；18-20min，245nm；柱温：30℃；进样量：20μl。在此检测条件下，速灭威、克百威、抗蚜威在20min与杂质得到较好的分离。 农药环境污染 【作者】 美）L.R.施奈德（L.R.Snyder）?等著； 【出版日期】1998.09 【出版社】北京：科学出版社 【ISBN】7-03-006615-4 【中图分类号】O652.63 谢 谢 ！ * * * Power switch has power supply status LED. Should be green if OK. Du