受体与分子毒理学讲义.pptVIP

配体与受体的结合是可逆的，这种结合属于单纯的双分子结合，在一定条件下，受体-配体复合物可解离为各自的单分子； 所有受体具有同等的亲和力，配体-受体复合物的形成不改变其他游离受体对配体亲和力的大小； 受体结合量与其生物效应成正比，当有限数量的受体与配体结合达到饱和时，说产生的生物效应最大； 配体在结合反应中不被代谢，反应体系中配体仅以两种形式存在，即与受体结合的配体和游离配体。 占领学说 放射配体结合试验的一般试验程序： 选择特定受体含量较高的器官组织或细胞，制备受体的粗提取物或纯化物 选择高比活性的标记配体，与含有受体的制备物在适宜的条件下温育 采用适当的分离方法（过滤、离心、层析等），获得与受体结合的标记配体 根据不同的实验设计，计算结合试验参数。 受体的调节在保持机体内环境的相对稳定性上发挥着重要的作用，机制比较复杂，设计多种细胞或分子水平的调节作用，但放射受体结合试验可以从受体调节的最终结果和受体结合量的改变反映出各种对受体的调节作用，结果直观、可靠，常用语分析外源化学物对受体的调节作用。 2.5.2 放射受体结合试验与受体的调节 上行调节：受体结合试验可以反映外源化学物对特定受体的调节作用，如果这种效应表现为受体结合量的增加，称为上行调节或受体的增敏作用。 上行调节通常是通过增加相关受体的基因表达来实现 e.g：神经系统中，突触传递的减弱可使把神经元上的有关受体呈代偿性增加。 2.5.2 放射受体结合试验与受体的调节 下行调节：如果配体与受体的相互作用导致受体结合量的减少，则称为下行调节或受体的脱敏调节。 下行调节的机制不同于上行调节，这是由于配体与受体的结合促使受体发生内移或使受体隐没，其结果是减少受体与配体的接触。因此，在长期接触外源化学物的情况下，机体反应的敏感性可能降低，出现对化学物的耐受现象。 2.5.2 放射受体结合试验与受体的调节 基因的差异表达在细胞的生长、发育以及细胞的损伤、死亡等各种生命现象中扮演着极其重要的角色，一种细胞不同于另一种细胞，在很大程度上正式由于所表达的基因不同。因此，基因表达的改变必然必然会倒是细胞的功能的异常。 2.5.3差异基因表达的检测 研究基因的差异表达不仅可以阐明特定基因的功能，同时可以分子外界因素（物理性和化学性）与特定基因的关系。许多外源化学物可以通过特定受体的介导作用，最终导致表达的改变。 因此，分析基因的差异表达对于阐明受体介导的毒性作用机制具有重要意义。 2.5.3差异基因表达的检测 3.受体的研究历史 1、19世纪末：受体概念 2、20世纪60年代：实体研究 3、20世纪80年代：分子生物学技术进展推进受 体研究 △ 基因克隆技术推出受体的一级结构 △ 定点致突变技术研究受体的结构和功能 ■ Goldstein 和 Brown 对 LDLR（低密度蛋白受体）与 FH（家族性胆固醇血症）关系的研究揭开受体分子病理学的序幕； ■ 发现多种重要疾病，如心血管病、肿瘤、糖尿病、免疫功能异常、神经精神疾病有受体的异常。 4、近年来：受体三维结构阐明 ▲ 揭示受体与配体相互作用机制 ▲ 阐明受体的信号转导机制 3.受体的研究历史 卤代芳烃与芳烃受体 过氧化物酶体增值剂及其激活受体 雌激素干扰物与雌激素受体 抗雄激素与雄激素受体 4.几种细胞内受体与外源化合物的毒作用机制 受体是通过与外源化学物相互作用，改变信号传递过程，来干扰细胞功能的； 有些受体生理功能及其内源性配体已经明确，有的目前还未发现其内源性配体；但外源化学物可以作为激动剂或拮抗剂影响其功能，因此便以化学物来命名这类受体，如芳烃受体。 卤代芳烃是广泛存在的环境污染物，如二恶英、多氯联苯等，其在环境中难于降解，且脂溶性极高，易产生生物蓄积和生物放大作用。卤代芳烃的健康危害包括促癌作用、致畸作用、免疫毒性、皮肤毒性、酶活性诱导、干扰内分泌平衡以及影响细胞生长、分化等效应。 尽管此类效应具有多样性，且有动物品系和组织器官的特异性，但其分子作用机制具有共性，即诱导基因的表达。 4.1卤代芳烃与芳烃受体 卤代芳烃通过与胞浆中一种受体蛋白高亲和地结合而导致生物学效应，成这种受体为芳烃