第七篇章真核基因表达调控.ppt

定义：保守氨基酸残基与锌离子结合，使中间的氨基酸残基回折成一种手指状结构，称为锌指。 一个α-螺旋与一个反向平行β片层的基部以锌原子为中心，通过一对半胱氨酸和一对组氨酸之间形成配位键相连接。 2、锌指（zinc finger)结构 锌指与DNA 的结合：C 端形成α-螺旋，插入大沟与 DNA 结合，N 端形成β-折叠； 糖皮质激素受体特异性 雌激素受体特异性 类固醇激素受体是以二聚体形式发挥其促进转录作用的。它们的两个锌指的功能不同。第1个锌指的右侧是控制与DNA结合的，第2个锌指的左侧则是控制形成二聚体的能力的。 3、碱性—亮氨酸拉链（basic-Leucine zipper，bZIP) 碱性区域插入DNA大沟，与DNA结合。 ?-螺旋的一侧集中了许多疏水氨基酸，疏水侧面相互作用形成二聚体。 ?-螺旋中亮氨酸频繁出现，且趋于每7个氨基酸残基出现一个亮氨酸，使在形成?-螺旋时，亮氨酸出现在?-螺旋的疏水一侧，并且直线排列。 碱性—亮氨酸拉链 ： 在拉链区的氨基端有约35个残基的碱性区(富含赖氨酸和精氨酸)。此区的作用是与DNA结合，它也形成?-螺旋。 亮氨酸拉链区的作用是将一对与DNA结合的区域拉在一起，以结合两个相邻的DNA序列。 碱性亮氨酸拉链结构域转录激活因子序列比较 bHLH蛋白是以二聚体与DNA结合并发挥作用的。 4、碱性—螺旋—环— 螺旋（basic-helix-loop-helix, bHLH) 碱性-螺旋-环-螺旋结构（basic helix-loop-helix，bHLH） 含40-50个氨基酸残基，其中含两个既亲水又亲脂的?-螺旋（helix）， ?-螺旋被不同长度的连接区（loop）分开。 bHLH蛋白借两个螺旋对应面上疏水基团相互作用形成同样亚基或不同亚基构成的 二聚体。 bHLH区使各亚基的两个碱性区正确定向。 与bHLH区相邻的是强碱性的区域，它是与DNA结合必须的。 5、同源域蛋白 同源域：是指编码60个保守氨基酸序列的DNA片段，广泛存在于真核生物基因组内，同源转换基因与生物有机体的生长、发育和分化密切相关。许多含有同源转换区的基因具有转录调控的功能，同源转换区氨基酸序列很可能参与形成了DNA结合区。 在真核生物中，反式作用因子的功能受蛋白质-蛋白质之间相互作用的调节变得精密、复杂，完整的转录调控功能通常以复合物的方式来完成，这就意味着并非每个转录因子都直接与DNA结合。是否具有转录活化域成为反式作用因子中唯一的结构基础。通常依赖于DNA结合结构域以外的30—100个氨基酸残基。 二、反式作用因子中的转录活化结构域 转录活化有下列几个特征性结构： 1、带负电荷的螺旋结构。糖皮质激素受体AP1家族的Jun及GAI4有酸性的螺旋结构，能与TFIID复合物中某个通用基因或RNA聚合酶II本身结合，并有稳定转录起始复合物的作用。 2、富含谷氨酰胺的结构。Oct1/2，Jun、AP2、血清应答因子（SRF）有相同的富含谷氨酰氨的结构域。 3、富含脯氨酸的结构。CTF—NF1因子的羧基端富含脯氨酸（达20%—30%），很难形成α螺旋。 细胞应答分为3个阶段： 外界信息的“感知”，即由细胞膜到细胞核内的信息传递； 染色质水平上的基因活性调控； 特定基因的表达，即从DNA→RNA→蛋白质的遗传信息传递过程。 第三节 蛋白质磷酸化对基因转录的调控 蛋白质的磷酸化及去磷酸化 由细胞膜到细胞核内的信息传递途径: ①细胞表面受体蛋白构象变化; ②细胞表面受体发生寡聚化。 受体分子活化细胞功能的途径： ①受体本身或受体结合蛋白具有内源酪氨酸激酶活性; ②配体与受体结合，通过G蛋白，活化丝氨酸/苏氨酸或酪氨酸激酶。 四、DNA甲基化与基因活性的调节 DNA甲基化能关闭某些基因的活性，去甲基化则诱导了基因的重新活化与表达。 1、DNA甲基化 DNA甲基化的主要形式 5-甲基胞嘧啶（5 – mC ) 7-甲基鸟嘌呤（7 – mG） N6 - 甲基腺嘌呤（ N6 – mG） CpG通常成串出现在DNA上，这段序列往往被称为CpG岛。 甲基化酶 日常型甲基化酶：在甲基化母链指导下使处于半甲基化的DNA双链分子上与甲基胞嘧啶相对应的胞嘧啶甲基化。 从头合成型甲基转移酶：催化未甲基化的CpG成为 mCpG, 它不需要母链指导，但速度很慢。 DNA甲基化 DNA构象变化 导致 影响 蛋白质与DNA的作用 抑制 转录因子与启动区DNA 的结合 2、DNA甲基化抑制基因转录的机理 3、甲基化与X染色体失活 雌性胚生哺乳类动物细胞中含有的两条X染色体之一在发育早期随机失活。并不是卵