第7章 实验动物技术.ppt

第七章 动物实验技术 动物实验（Animal Experiment）：以实验动物为实验材料，采用人为的处理方法和手段，观察动物的反应、形态和机能方面的变化及其发展规律，在此基础上做出进一步的分析和判断，得出结论。 动物实验按机体水平的不同可分为整体实验和离体实验两种 还可进一步具体地分为亚细胞、细胞、组织、器官，整体动物和无损伤动物等水平的实验。 按时间长短可分为急性实验（2天内）、亚急性实验（1～4周）和慢性实验（2～6个月或更长时间甚至整个动物生命期）。 动物实验的优点： 1、可以严格控制实验条件 2、实验周期短 3、可以替代临床不宜进行的实验 4、可以获得大量的实验样本和可靠的实验材料 动物实验的缺点： 1、动物实验的结果只能作为对照和参 2、在发病原因上人类疾病和动物模型不尽相同 3、动物处于麻醉状态时接受的处理因素的反应与人不一致 4、离体实验与在体实验结果有一定差异 5、人类有些疾病还无法用动物实验进行研究 动物实验的发展趋势： 一、使用动物的数量不断下降 二、使用动物的质量在不断提高 三、使用动物的种系在不断提高 四、动物实验模型走向商品化 五、动物替代物和替代方法不断应用 第一节 动物实验前的准备 理论准备： 1、了解有关实验动物方面的基础知识 2、正确选题立项和设定假设 3、实验研究计划和方案的制订 4、实验方法的选定 条件准备： 1、复制动物模型法 2、切开、分离法 3、切除和注入提取液法 4、离体组织器官法 5、瘘管法 6、移植法 7、生物电、活性观察法 8、病理解剖学、组织学观察法 9、免疫学观察法 10、其它方法 如联体动物法，条件反射法、生物遗传法、放射生物法、药物化学法等等。 主要指准备好实验仪器、药品、试剂和实验动物 ①购入或领取实验动物前，检查各项实验前的准备工作，如动物盒具数量、饲养室卫生及消毒情况等。 ②购入或领取实验动物时，向供应部门索取动物的遗传背景和微生物质量资料（动物质量合格证）、以及动物品系、年龄、体重、胎次等资料。 ③根据试验观察时间的长短，同时购入或领取相应数量的饲料和垫料。 ④动物需长途运输时，注意途中污染和窒息死亡等问题。 ⑤购入清洁级以上实验动物，采用带有空气过滤膜的或过滤帽的盒，严格检查其密封状况。 预备实验： 预备实验是对正式实验进行初步试验。其目的在于检查各项准备工作是否完善，实验方法和步骤是否切实可行，测试指标是否稳定可靠，初步了解实验结果与预期结果的距离，从而为正式实验提供补充、修正的意见和经验，是动物实验必不可少的重要环节。 预备实验的结果不能归入正式试验的最后结果中一同分析。 动物实验的设计与分组 动物实验设计的基本原则： 对照性原则 实验对象随机分设对照 一致性原则 实验组与对照组除了处理因素不同外，非处理因素基本保证均衡一致 重复性原则 同一处理要设置多个样本例数 随机性原则 按照机遇相等的原则来进行分组 客观性原则 选择观察指标时，不用或尽量少用带有主观成分的指标。结果判断更不能以主观的意愿对结果或数据作任意的改动和取舍。 动物实验设计方法介绍 1、单组比较设计 指在同一个体上观察实验处理前后某种观测指标的变化。优点是能清除个体间生物差异，但不适用于在同一个体上多次进行实验和观察的情况。 2、配对比较设计 指实验前将动物按性别、体重或其他因素加以配对，以基本相同的两个动物为一对，配成若干对，然后将一对动物随机分配于两组中，两组动物的数量、体重、性别等情况基本相同，取得均衡进行实验，以减少误差及动物组间的个体差异。 3、随机区组设计 是配对比较设计的扩大。将全部动物按体重、性别及其他条件等分为若干组，每组中动物数目与划分的组数相等，体质条件相似，再将每个区组中的每一只动物进行编号，得用随机数字表法将其分配到各组。 4、完全随机设计 将每个实验对象随便机分配在各组，并从各组实验结果的比较中得出结论。优点是设计和统计的处理都较简单，但在例数较少时往往不能保证组间的一致性。 第二节 动物实验的基本操作技术 一、实验动物的抓取与固定 大、小鼠的抓取固定 小鼠固定盒固定 大鼠固定盒固定 豚鼠的抓取固定法 家兔的抓取固定法 二、 实验动物被毛的去除方法 剪毛：固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。固定动物后，用粗剪刀剪去所需部位的被毛。剪毛时需注意以下几点： 1、把剪刀贴紧皮肤剪，不可用手提起被毛，以免剪破皮肤； 2、依次剪毛，不要乱剪； 3、剪下的毛集中放在一个容器内，勿遗留在手术野和手术台周围，以保证手术野的清洁和防止注射器等夹毛。 拔毛：兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时，需用拇指、食指将局部被毛拔去，以利操作。 脱毛：脱毛系指用化学药品