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检测（二十九） “胚胎工程与生态工程”课前诊断卷 考点一 胚胎工程 1.哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段，该项技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。如图表示研究人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法。请分析回答： (1)方法一中，研究人员需对实验小鼠注射_______________，使其_________________，从而获得更多的卵母细胞。用SrCl2溶液处理激活卵母细胞，在体外选用特制的培养液培养至____________期，从内细胞团中分离、筛选出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤雌单倍体胚胎干细胞。 (2)采用方法二可获得孤雄单倍体胚胎干细胞。受精阶段，防止多精入卵的第一道屏障是__________________。研究人员用特定方法去除细胞M中的________原核，再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选。 (3)研究发现，小鼠单倍体胚胎干细胞存在自发二倍体化的现象。可以通过测定并分析细胞内DNA分子的含量，或利用显微镜观察细胞中的染色体数目进行确定，最好选择处于________________(写出分裂类型及时期)的细胞进行观察。 解析：(1)方法一中，对实验小鼠注射促性腺激素，可使其超数排卵，从而获得更多的卵母细胞。胚胎发育至囊胚时分化为内细胞团和滋养层细胞。 (2)受精阶段，防止多精入卵的第一道屏障是透明带反应。精卵细胞融合后，先形成雄原核和雌原核，去除细胞M中的雌原核，再对处理后的细胞进行进一步的培养、分离和筛选，即可获得孤雄单倍体胚胎干细胞。(3)利用显微镜观察细胞中的染色体数目，最好选择处于有丝分裂中期的细胞进行观察，此时染色体形态固定，数目清晰。 答案：(1)促性腺激素　超数排卵　囊胚　 (2)透明带反应　雌　(3)有丝分裂中期 2．干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降。科学家设计了以下流程，利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗，根据所学的知识，结合图中相关信息，回答以下问题： (1)上图中进行的是_________(填“体内”或“体外”)基因治疗，该过程中利用的生物工程技术手段有动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、转基因技术和 _________________等。　 (2)ES细胞是由早期胚胎或_____________中分离出来的一类细胞。 (3)步骤③中，需要构建含有干扰素基因的__________，该结构除了复制原点外，至少包含___________________________和干扰素基因等；为检测干扰素基因是否表达，可以采用 _________________的方法。 (4)为了快速获得更多的目的基因常常采用__________技术进行扩增。 解析：(1)分析图解可知，上图中进行的是体外基因治疗，该过程利用的生物工程技术手段有动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、转基因技术和核移植技术等。(2)ES细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，利用其具有(发育的)全能性，可以将其培养成人体各种组织器官。(3)步骤③中，需要构建含有干扰素基因的基因表达载体，基因表达载体除了复制原点外，至少包含启动子、终止子、标记基因和干扰素基因等；为检测目的基因的表达情况，可采用抗原－抗体杂交技术，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。(4)可以利用PCR技术对体外基因进行大量扩增。 答案：(1)体外　核移植技术　(2)原始性腺　(3)基因表达载体　启动子、终止子、标记基因　抗原—抗体杂交　(4)PCR 3．科学家应用现代生物技术培育出了荧光转基因克隆兔，培育过程如下，回答下列问题： (1)上述过程中运用的生物技术有_____________________________(写出两个即可)。将重组质粒导入甲兔的成纤维细胞时，通常用____________法。 (2)为避免杂菌污染，②过程要求______________的培养环境，培养的空气中通常需含5%的CO2，目的是________________________。培养基中除加入一些基本的营养成分外，通常需加入血清等一些天然成分。对重组细胞中荧光蛋白基因进行检测的方法是________________。 (3)胚胎移植前必须对代孕母兔和供体母兔用激素进行___________处理。如果想获得核基因型相同的多个胚胎，常采用的方法是___________，处理的时期是__________________。 解析：(1)上述过程中运用的生物技术有基因工程、动物细胞培养、动物体细胞核移植或胚胎工程。成纤维细胞为动物细胞，所以导入的方法是显微注射法。(2)为避免杂菌污染，②过程要求无菌、无毒的培养环境，CO2可以维持培养基的pH，对重组细胞中荧光蛋白基因