Eclectica检测原理- 内部培训internal .pptVIP

体外诊断定义 体外诊断是通过特定的实验方法对实验室采集的人体样本（各种体液、细胞、组织样本等）进行定性或定量分析。 体液包括 血液 尿液 粪便 唾液 其它 体外诊断的分类 常规体外诊断包括： 临床常规检验-血常规、尿常规… 临床生化检验-血脂、肝功能、肾功能… 临床免疫检验-乙肝、HIV、甲状腺功能… 临床微生物检验-细菌培养、细菌鉴定… 体外诊断的分类 常规体外诊断包括： 临床常规检验-血常规、尿常规… 倾向于检测体液中的有形成分，通过仪器等可以看到起形态，如血细胞的形态，血细胞计数等。 临床生化检验-血脂、肝功能、肾功能… 临床免疫检验-乙肝、HIV、甲状腺功能… 生化和免疫检验用于检测体液中的一些特殊物质，这些物质无法看到其形态，但在体内保持特有的生化和免疫特性 临床微生物检验-细菌培养、细菌鉴定… 不同分析物分子量与体液中浓度列表 Eclectica的检测原理 方法学 免疫：磁微粒免疫定量分析 生化：终点法、动力学法、两点法 特定蛋白：免疫比浊法 什么是“磁微粒分离技术”？ 在20世纪80年代初，瑞士Serono诊断公司（亚特斯公司前身）研制出 “磁微粒分离免疫测定（MAIA）” 专利技术（美国专利号：4659678），成为于20世纪90年代起在全球得到广泛应用的微粒子或磁微粒分离化学发光免疫分析的基础技术 是目前最优的一种微粒子分离技术，该技术是利用制备出的 直径为微米级（2-3μm）的活性超顺磁性微粒均匀悬浮在液体之中 磁微粒表面大量偶联了特异性抗体 与被分离物进行快速的特异性结合 用外加磁场将结合有被分离物的磁微粒沉降吸附下来 清洗去掉其它杂质 最终仅获得磁微粒与被分离物的特异性复合体 磁微粒与被分离物用特殊手段可进一步分离 磁微粒分离载体技术要点 磁微粒分离技术相比微孔板分离的技术优势 优化成准液相反应 反应面积、几率大大增加，从而增加反应速度 制备的试剂具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、结果准确可靠的特点 磁微粒分离技术是目前在异相标记免疫分析法应用中最先进的分离技术 磁微粒分离技术在定量免疫分析中的应用 基于 “磁微粒分离免疫测定 (MAIA) ” 技术的标记免疫分析产品可更加敏感、准确的测定体内微量活性物质： 内分泌激素 蛋白质 微生物抗原/抗体 核酸 神经递质 受体 细胞因子 肿瘤标记物 细胞表面抗原 血药浓度等 进一步加强对基础医学、临床医学的发展 磁微粒分离技术在定量免疫分析中的应用 目前已发展 磁微粒分离放射免疫定量检测试剂 磁微粒分离酶免定量检测试剂 磁微粒分离化学发光定量检测试剂 磁微粒分离电化学发光定量检测试剂 市场上应用该技术的主要产品 Roche E170 全自动免疫分析仪 Abbott i2000 全自动免疫分析仪 Adaltis Eclectica 全自动磁微粒免疫定量分析仪 Bayer ACS180 全自动免疫分析仪 …… Eclectica免疫检测的性能特点-MAIA技术 Eclectica免疫分析采用亚特斯专利的磁微粒分离免疫技术（MAIA） 采用Fe3O4核心的磁微粒为固相载体——磁性微粒表面积大，蛋白吸附能力极强，与包被管或包被珠相比反应表面积增大50倍是目前最理想的免疫固相分离载体之一。 磁微粒增进了结合动力并保证了较大的敏感度。分散悬浮液的反应速率接近均相溶液的动力学，同時抗原抗体的相对反应浓度增高，增快了捕捉的有效性，提高了精确度，加快了免疫反应的速度。 采用磁场磁性分离技术。磁铁吸附住磁微粒，能更有效的将游离相和结合相分离。 Eclectica免疫检测的性能特点-反应模式示例 Eclectica免疫检测的性能特点-FITC标记 Eclectica免疫检测的性能特点-ALP标记 Eclectica免疫检测原理-夹心法原理 夹心法（适用于二价及以上大分子量抗原如FSH、TSH、AFP） FITC标单克隆抗体 酶标单克隆抗体 试剂瓶中成分为以上两种抗体的混合物 酶标单克隆抗体，FITC标单克隆抗体分别与标本抗原的不同部位结合，形成夹心复合物 Eclectica免疫检测原理-夹心法原理 磁微粒联接的抗荧光素抗体与免疫复合物中的荧光素结合，形成磁微粒-抗荧光素抗体-荧光素标抗标本抗体-标本抗原-酶标抗体聚合物 Eclectica免疫检测原理-磁性分离 Eclectica免疫检测原理-显色和测量 Eclectica免疫检测原理-竞争法原理 竞争法（适用于细小的抗原分子检测如T3、T4、E2） 标本抗原和FITC结合的抗原衍生物竞争酶标抗体 标本抗原与FITC抗原衍生物相互竞争抑制 若标本抗原含量大，则FITC抗原衍生物与酶标抗体结合小，反之则与之结合大 Eclectica免疫检测原理-竞争法原理