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食品检验工（高级）国家职业技能鉴定 理论培训 主 讲：张 滨 长沙环境保护职业技术学院环境科学系 食品检验工（高级）技能考核（第一套） 一、显微镜的发展 二、显微镜基本构造 普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统。 机械装置  显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件 （1）镜座 ? 镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系 统部件的基础。 （2）镜筒 ? 镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与物镜（装在转换器下）间的暗室。 （3）物镜转换器 ? 物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。 （4）载物台? 载物台中央有一孔，为光线通路。在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。 （5）推动器? 是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，在纵横架杆上刻有刻度标尺。 （6）粗动螺旋 ? 是移动镜筒调节物镜和标本间距离的机件 （7）微动螺旋? 用粗动螺旋只可以粗放的调节焦距，要得到最清晰的物象，需要用微动螺旋做进一步调节。微动螺旋每转一圈镜筒移动0.1毫米。 光学系统  由反光镜、聚光器、物镜、目镜等组成，光学系统使物体放大，形成物体放大像 。  三、显微镜基本操作 1、? 观察前的准备 （1）显微镜的搬运 显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂，左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。 （2）显微镜的放置 将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右，右侧可放记录本或绘图纸。 （3）调节光的强度 接通电源，可利用灯光通过反光镜来调节光强度。 2、观察? （1）低倍镜观察? 将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器，使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物镜调至接近标本处，用调节旋钮慢慢下降载物台，直至物像出现直到物像清晰为止。用推动器移动标本片，找到合适的目的像并将它移到视野中央进行观察。 （2）高倍镜观察? 在低倍物镜观察的基础上转换高倍物镜。 （3）油镜观察? 先用粗调节旋钮将载物台下降，并将高倍镜转出；在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油；用调节旋钮将载物台缓缓地上升，使油镜浸入香柏油中；用调节旋钮调至最清晰为止；观察完毕，下降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油。 3、显微镜的保养 （1）观察完后，移去观察的载玻片标本。 （2）用过油浸镜的，先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸蘸着二甲苯擦拭2—3次，再用擦镜纸将二甲苯擦去。 （3）转动物镜转换器，将目镜呈现八字放置与载物台错开。 （4）将载物台下降到最低位置。 四、评分细则及说明 第二套 细菌革兰氏染色技术 一、 起源 革兰氏染色是用来鉴辨细菌的一种方法，细菌细胞壁上的主要成份不同，利用这种染色法，可将细菌分成两大类。这种染色法是由一位丹麦医生汉斯?克里斯蒂安?革兰(1853年-1938年)于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系。 革兰氏染色的对象是细菌的细胞壁。染色后的细菌可在显微镜下更好的观察，以便于区分。 该染色法是以丹麦医生和细菌学家汉斯?克里斯蒂安?格兰的名字命名的，他在19世纪末发展出这一方法。 二、特别提醒 不同的细菌在该染色法的作用底下反应不同，借以区分成为两类： 格兰氏阳性细菌, 胞壁染色后呈蓝紫色 格兰氏阴性细菌, 染色后呈红色。 （1）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片的中央滴一滴蒸馏水，按无菌操作法取菌涂片做成菌液。 （2）晾干：让涂片自然晾干或者在酒精灯火焰上方文火烘干。 （3）固定：手执玻片一端，让菌膜朝上，通过火焰2-3次固定。 （4）结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。 （5）水洗：倾去染色液，用水小心地冲洗。 （6）媒染：滴加卢哥氏碘液，媒染1min。 （7）水洗：用水洗去碘液。 （8）脱色：将玻片倾斜，连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色。 （9）复染：滴加蕃红复染1min。 （10）水洗：用水洗去涂片上的蕃红染色液。 （11）晾干：将染好的涂片放空气中晾干或者用