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* 第三章 培养基 第一节 培养基的类型 第二节 培养基的成分及来源 第一节 培养基的类型 1、按培养基成分 1）合成培养基 ? 所用原料的化学成分明确、稳定 如葡萄糖、硫酸铵 ? 适于研究菌种基本代谢和过程的物质变化等科研工作；在生产某些疫苗的过程中，为了防止异性蛋白质等杂质掺入，也常用合成培养基； ? 营养单一、价格较高，不适于大规模生产 2）天然培养基 ? 原料是一些天然动、植物产品 如花生饼粉、蛋白胨等 ? 来源广泛（大多为农副产品）、营养丰富、价格低廉、适于工业化生产 ? 一般不需要另加微量元素、维生素等物质 ? 由于成分复杂，不易重复，如对原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性 2、按物理状态分 1）固体 ? 适于菌种和孢子的培养与保存，也广泛应用于有子实体的真菌类，如香菇、白木耳等的生产； ? 近年来由于机械化程度的提高，在发酵工业上又开始应用固体培养基进行大规模生产，其组分常用麸皮、大米、小米、木屑、禾壳等。 2）半固体 ? 琼脂0.5%-0.8% ? 主用于鉴定细菌、观察细菌运动特征及噬菌体的效价测定等 3）液体 发酵工业大规模使用的培养基 3、按用途分 基础培养基 富集培养基 选择培养基 鉴别培养基 孢子培养基 种子培养基 发酵培养基 供菌种繁殖孢子的培养基，常用固体培养基。 1）孢子培养基 孢子培养基基本要求： 配制时需注意： A）营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。 如灰色链霉菌在葡萄糖-硝酸盐-其他盐的培养基上都能很好地生长和产生孢子，但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后，就只长菌体而不产孢子 B）所用无机盐的浓度要适量，否则会影响孢子量和孢子颜 色。 C）注意pH和培养基的湿度。 基本要求是能使菌体迅速生长，产生较多优质孢子，且不易引起菌种发生变异。 常用孢子培养基： ◆ 麸皮培养基 ◆ 小米培养基 ◆ 大米培养基 ◆ 玉米碎屑培养基 ◆ 用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制的琼脂斜面培养基 大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少、疏松、表面积大，是良好的孢子培养基。 2）种子培养基 供孢子发芽、生长和菌体繁殖的培养基。 ? 营养要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也要高些，但总浓度以略稀薄为好，这样可达较高的溶解氧，供大量菌体生长和繁殖。 ? 种子培养基的成分要考虑在代谢过程中能维持稳定的pH，其成分还要根据不同菌种的主要特征而定。 ? 一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源，因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用，有利菌体的迅速生长，所以在种子培养基中常包括有机氮源和无机氮源。 ? 最后一级的种子培养基的成分最好能较接近于发酵培养基，这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应，快速生长。 3）发酵培养基 ? 既要使种子接入后能迅速生长，达到一定的菌体浓度，又要使长好的菌体能迅速合成所需产物。因此，发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有合成产物所需的特定元素、前体和促进剂等。 供菌体生长、繁殖和合成大量代谢产物用的培养基。 ? 但若因生长和合成产物所需的总的碳源、氮源和其他营养物质总的浓度太高，或生长和合成产物两个阶段各需的最佳条件有求不同时，则可考虑培养基用分批补料工艺来加以满足。 第二节 培养基的成分及来源 一、碳源 主要功能： 1）为菌体的生长繁殖提供能源和合成菌体所必需的成分； 2）为合成目的产物提供所需的碳素成分 常用的碳源: 特殊情况下（如碳源贫乏时），蛋白质水解物或氨基酸等也可被微生物作为碳源使用。 糖类 油脂 有机酸 低碳醇等 1、糖类 ? 发酵培养基中使用最广泛的碳源; ? 主要有葡萄糖、糖蜜和淀粉糊精等 纯葡萄糖、水解淀粉 纯乳糖、乳清粉 大麦、花生粉、燕麦粉、黑麦粉等 甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜、粗红糖、精白糖等 葡萄糖 乳糖 淀粉 蔗糖 来 源 糖类 工业上常用的糖类及来源 淀粉水解糖的制备是发酵生产的一项重要工艺。 葡萄糖 ? 最易利用，几乎所有微生物都能利用 ? 葡萄糖常作为培养基的一种主要成分，并且作为加速微生物生长的一种有效糖。 ? 但过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸，以至培养基中的溶解氧不能满足需要，使一些中间代谢物（如丙酮酸、乳酸、乙酸等）不能完全氧化而积累在菌体或培养基中，导致pH下降，影响某些酶的活性，从而抑制微生物的生长和产物的合成。 糖蜜 ? 制糖的结晶母液，它是制糖工业的副产物; ? 含有丰富的糖、氮类化合物、无机盐和维生素等，是微生物发酵培养基价廉物美的碳源; ? 糖蜜主要含有蔗糖，总糖可达50%-75%。 ? 糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜，二者在糖的含量和无机盐的