巯基的化学修饰.PPTVIP

食品生物技术精品课程 主讲：刘常金 第二章蛋白质修饰 内 容 酶蛋白的化学修饰 酶蛋白化学修饰的应用 蛋白质改造的分子生物学途径 酶蛋白的化学修饰 酶蛋白侧链的修饰 酶蛋白的亲和修饰 酶的化学交联 酶蛋白侧链的修饰 羧基的化学修饰 氨基的化学修饰 精氨酸胍基的化学修饰 巯基的化学修饰 组氨酸咪唑基的化学修饰 羧基的化学修饰 水溶性的碳二亚胺是特异修饰酶的 COOH，也是最普遍的标准方法 羧基的甲酯化 氨基的化学修饰 ε－NH2具有亲核性 烷基化： 修饰剂有：卤代乙酸、芳基卤（DNFB)、芳香族磺酸（TNBS） 烷基化：与醛酮还原烷基化 蛋白质序列分析中的 DNS 精氨酸胍基的修饰 修饰剂具有两个邻位羰基的化合物 例：丁二酮，1，2－环己二酮 精氨酸胍基的修饰 巯基的化学修饰 巯基具有很强的亲核性 烷基化:基于碘乙酸的荧光试剂 Enzyme-SH + ICH2COOH Enzyme-S-CH2COOH 巯基的化学修饰 N－乙基马来酰亚胺是专一性强的修饰剂，产物在300nm有最大吸收 与DTNB,Ellman试剂反应生成二硫键 有机汞试剂专一性强，产物在250nm处有最大吸收 巯基的化学修饰 组氨酸咪唑基的修饰 DPC在中性pH下有专一性，产物在240nm处有最大吸收 碘代