不同强度运动后大鼠心肌细胞热休克蛋白72 mRNA的表达.docVIP

不同强度运动后大鼠心肌细胞热休克蛋白72 mRNA的表达 杨德洪 （上海应用技术学院体育教育部 漕宝路120号 上海 200235） 摘要 热休克蛋白（heat shock proteins,HSP）是一种古老的保护性蛋白，存在于整个生物界，具有普遍的生物学意义。运动可以诱导HSP mRNA在生物体不同组织器官内表达。本研究在进一步证实运动可以诱导大鼠心肌细胞表达HSP mRNA的同时，试图明确不同运动强度及运动持续时间是否对心肌细胞HSP mRNA的表达有不同的影响，探讨是否存在诱导心肌细胞表达HSP mRNA的最适宜运动强度，为进一步研究运动性心脏提供思路。 关键词 热休克蛋白 运动 适应 心肌细胞 负荷 1.实验材料和方法 1.1实验动物和喂养 健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠60只，体重为180～220g，购自上海计划生育研究所西普而—必凯实验动物有限公司，随机分为安静对照组（C组）、低强度 （60% VO2max ）运动组（Ta组）、中等强度 （75% VO2max ）运动组（Tb组）和高强度 （85% VO2max ）运动组（Tc组）。每一运动组又分成1、2、3天运动组，每组6只。分笼饲养，饲养笼选用塑料制品，并配用不锈钢罩、玻璃吸水瓶和不锈钢吸水管，国家标准啮类类动物固体混合饲料喂养，自由饮食。动物室温度22～28°C，相对湿度50%～55%。 常规适应性喂养1周 后，大鼠在可调式大鼠电动跑台上进行慢跑适应，速度为10－12米／分，每次慢跑距离不超过100米，共进行2天。2天后，以10米／分速度跑3分钟，15米／分跑3分钟。 1.2训练方法 训练强度参考Bedford(1979)大鼠跑台运动负荷确定原则。在大鼠适应训练后休息3天，即对大鼠进行训练。训练方式为跑台运动。安静对照组不运动，运动组每天运动1小时 。Ta组、Tb组和Tc组分别以60% VO2max、75% VO2max和85% VO2max的强度进行运动，持续时间又依组别的不同分为运动一天、两天和三天。 1.3样品制备 实行不同运动方案后休息24小时，然后在相同时间断头处死动物，对照组也同时处死，迅速开胸取出心脏，剔除筋膜等周围组织，于0~4℃生理盐水中洗去血液，滤纸吸干后置_72℃冰箱待测。 1.4大鼠心肌细胞HSP72 mRNA的检测 采用RT-PCR法。 1.5统计处理方法 实验数据由SAS统计软件包处理，组间比较采用t检验，显著性标准为p0.05。 2.实验结果 2.1 对照组大鼠心肌细胞HSP72 mRNA的表达 大鼠在安静情况下心肌细胞存在HSP72 mRNA的基础结构性表达。（如图2）。 2.2 60% VO2max强度运动后大鼠心肌细胞HSP72 mRNA的表达 低强度（60% VO2max）运动一天后心肌细胞HSP72 mRNA表达与对照组无显著性差异，随运动时间的延长，HSP72 mRNA表达逐渐增加（见图2和表3）。 图2 60% VO2max组大鼠运动后心肌细胞HSP72 mRNA表达的变化 表3 低强度运动后大鼠心肌细胞HSP72 mRNA表达的变化 C组 T1组 T2组 T3组 0.52±0.05 0.83±0.08 1.59±0.29* 2.02±0.18* 注:*p0.05，与对照组比较 75% VO2max强度运动后大鼠心肌细胞HSP72 mRNA的表达 中等强度（75% VO2max）运动后心肌细胞HSP72 mRNA表达随运动持续时间的延长显著增加, 运动一天组、两天组及三天组心肌细胞HSP72 mRNA的表达与对照组有显著性差异。但两天和三天组表达量无显著性差异。（见图3和表4） 图3 75% VO2max组大鼠运动后心肌细胞HSP72 mRNA表达的变化 表4 中等强度运动后大鼠心肌细胞HSP72 mRNA表达的变化 C组 T1组 T2组 T3组 0.53±0.06 1.34±0.06* 2.49±0.21* 2.68±0.16* 注: *p0.05，与对照组比较 85% VO2max强度运动后大鼠心肌细胞HSP72 mRNA的表达 高强度（85% VO2max）运动后心肌细胞HSP72 mRNA表随运动持续时间的延长显著增加。同中等强度下的结果相似（见图4和表5）。 图4 85% VO2max组大鼠