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干细胞分离仪与传统手工法 干细胞分离仪与传统手工法 分离脐血效果的比较研究 分离脐血效果的比较研究 广州医学院附属市一人民医院 广州医学院附属市一人民医院 广州市临床医学研究所 广州市临床医学研究所 魏亚明 魏亚明 1988年Broxmeyer 首先证 明脐带血 1988年Broxmeyer 首先证 明脐带血 （umbilical cord blood,UCB ）中富含造血 （umbilical cord blood,UCB ）中富含造血 干细胞 （hematopoitic stem cells,HSCs ）。 干细胞 （hematopoitic stem cells,HSCs ）。 同年法国Gluckman 等进行了世界上第 １例 同年法国Gluckman 等进行了世界上第 １例 采用同胞兄妹的脐血移植治疗Fanconi 贫 采用同胞兄妹的脐血移植治疗Fanconi 贫 血患儿并获得成功。 血患儿并获得成功。 2004年新英格兰医学杂志统计时全世界已有 2004年新英格兰医学杂志统计时全世界已有 5000 余人接受了脐血干细胞的移植。 5000 余人接受了脐血干细胞的移植。  脐血库发展离不开脐血收集分离技术的进步。  脐血库发展离不开脐血收集分离技术的进步。  传统的脐血分离方法是用羟乙基淀粉沉淀离  传统的脐血分离方法是用羟乙基淀粉沉淀离 心法或密度梯度离心法分离出有核细胞 （含 心法或密度梯度离心法分离出有核细胞 （含 干细胞）。 干细胞）。  这些方法对分离人员操作技术要求高、回收  这些方法对分离人员操作技术要求高、回收 效率差异大，且有污染可能。 效率差异大，且有污染可能。  实验采用干细胞分离仪分离脐血，其分离效  实验采用干细胞分离仪分离脐血，其分离效 果与传统脐血库使用的羟乙基淀粉手工分离 果与传统脐血库使用的羟乙基淀粉手工分离 法进行比较。 法进行比较。 材料： 材料：    实验于2006－12 ／2007－05 在广州医  实验于2006－12 ／2007－05 在广州医 学院附属市一人民医院完成。 学院附属市一人民医院完成。  ３９份脐血采自该院妇产科健康顺产  ３９份脐血采自该院妇产科健康顺产 新生儿脐带，产妇均知情同意。 新生儿脐带，产妇均知情同意。 方法： 方法： 脐血保存 与分组 ：采集脐血量 脐血保存 与分组 ：采集脐血量 50～ 100 ｍＬ／份，每份含CPDA 保 50～ 100 ｍＬ／份，每份含CPDA 保 养液25ｍＬ，收集保存。随机分为仪 养液25ｍＬ，收集保存。随机分为仪 器分离组 17 份、手工分离组22 份。 器分离组 17 份、手工分离组22 份。 主要观察指标： 主要观察指标：  ①分离前后脐血体积的变化。  ①分离前后脐血体积的变化。  ②分离前后脐血样本有核细胞数量的变  ②分离前后脐血样本有核细胞数量的变 化。 化。  ③分离前后脐血样本 ＣＤ３４＋细胞  ③分离前后脐血样本 ＣＤ３４＋细胞 数量的变化。 数量的变化。  ④脐血样本红细胞去除情况。  ④脐血样本红细胞去除情况。 为干细胞移植治疗及再生医 学研发提供安全可靠及重复 性好的细胞处理技术 干细胞分离仪脐血分离法 干细胞分离仪脐血分离法  收集脐血称质量，计算体积。在开始处理前  收集脐血称质量，计算体积。在开始处理前 ２０ｍｉｎ，缓慢加入相当于 ２０％脐血 ２０ｍｉｎ，缓慢加入相当于 ２０％脐血 体积的 ６０ｇ／Ｌ羟乙基淀粉 （ＨＥ 体积的 ６０ｇ／Ｌ羟乙基淀粉 （ＨＥ Ｓ），加入过程中充分混匀。关闭干细胞分 Ｓ），加入过程中充分混匀。关闭干细胞分 离仪工具包所有开关，连接于脐血袋 上， 离仪工具包所有开关，连接