晶芯原核生物样本标记试剂盒使用说明书博奥生物有限公司.pdfVIP

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2018-06-02 发布于河南
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晶芯原核生物样本标记试剂盒使用说明书博奥生物有限公司.pdf

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晶芯原核生物样本标记试剂盒使用说明书博奥生物有限公司

『简介』 1. 产品描述 ® 晶芯原核生物样本标记试剂盒是利用CbcScript Ⅱ和随机引物对原核生物的 Total RNA 进行反转录得到cDNA ，再用Klenow Fragent 酶对cDNA 进行荧光标记，荧光标记的DNA 产物与芯片上的DNA 探针杂交，用于基于芯片技术的基因表达分析。之所以没有在反转录中直接掺入荧光素，是基于反转录酶对荧光分子的亲和性不高； ® 而Klenow Fragent 酶对荧光亲和性高；同时用Klenow Fragent 酶标记的DNA 片段大晶芯原核生物样本标记试剂盒小分布在200 bp 左右，有利于杂交动力学过程。本试剂盒适合标记来源于细菌、RNA 病毒等生物材料的Total RNA （纯化后的 Total RNA 需20µg ）。 2. 样品标记过程概述 ® 产品目录号：360061-10 晶芯原核生物样本标记试剂盒的样品标记原理见图1，简要说明如下： 2.1 反转录：以Total RNA 为模板， Random Primer 为引物，用CbcScript Ⅱ酶进行反转录，纯化回收得到的cDNA 并定量。 2.2 标记：以cDNA 产物为模板， Random Primer 为引物，用Klenow Fragment 酶在合成cDNA 互补链的过程中掺入带有荧光基团的dNTP （Cy3-dCTP 、Cy5-dCTP ）。纯化并定量标记产物。标记的DNA 在与芯片上探针杂交后即可用芯片扫描仪检使用说明书测分析。博奥生物有限公司