2019版高考生物一轮复习苏教版讲义：选修3+第1讲+基因工程.docVIP

选修　现代生物科技专题 第1讲　基因工程 考纲要求 全国卷五年考情基因工程的诞生(Ⅰ) 无考题2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ) 2017T38，2017·卷ⅡT卷ⅢT卷ⅠT6·卷ⅢT卷ⅠT基因工程的应用(Ⅱ) 2014卷ⅡT卷ⅠT蛋白质工程(Ⅰ) 2015卷ⅠT卷ⅡT卷ⅠT 考点一| 基因工程的基本工具(对应学生用书第241页) [识记—基础梳理] 1．基因工程的概念及优点(1)概念：是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法对生物的基因进行改造和重新组合然后导入受体细胞并使重组基因在受体细胞中表达产生人类需要的基因产物的技术。(2)遗传原理：基因重组。(3)优点：与杂交育种相比：克服了远缘杂交不亲和的障碍。与诱变育种相比：能定向改造生物的遗传性状。2．基因工程的基本工具(1)限制性核酸内切酶来源：主要从原核生物中分离纯化而来。作用：识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。结果：产生黏性末端或平末端。(2)DNA连接酶常用类型 连接酶 T连接酶来源 大肠杆菌 T噬菌体功能 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端结果 恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键(3)载体 ②其他载体：λ噬菌体衍生物、动植物病毒等。[理解—深化探究]1．限制酶(1)识别序列的特点：呈现碱基互补对称无论是奇数个碱基还是偶数个碱基都可以找到一条中心轴线如以中心线为轴两侧以为轴两侧碱基互补对称。(2)切割后末端的种类 2．限制酶和DNA连接酶的关系 (1)限制酶DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。(2)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。(3)DNA连接酶起作用时不需要模板。3．载体(1)条件与目的条件 目的稳定并能复制 目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个 可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择(2)作用作为运载工具将目的基因转移到宿主细胞内。利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。[运用—考向对练]1．下表是几种限制酶识别序列及其切割位点图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：限制酶 识别序列及切割位点 ↓GGATCC CCTAGG ↑ ↓TGATCA ACTAGT ↑ ↓ GATC CTAG ↑ ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ 图1　　　　　　　　　图2(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒应选用________两种限制酶切割酶切后的载体和目的基因片段通过________酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒需将其转入处于________态的2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌应在筛选平板培养基中添加________平板上长出的菌落常用PCR鉴定所用的引物组成为图2中________。(3)若酶切的DNA末端与酶切的DNA末端连接连接部位的6个碱基对序列为________对于该部位这两种酶________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开。(4)若用切图1质粒最多可能获得种大小不同的DNA片段。[解析]　(1)选择的限制酶应在目的基因两端且在质粒中存在识别位点故可以用来切割的限制酶为、、和但由于和可能使质粒中的启动子丢失或破坏抗性基因所以应选用、两种限制酶切割。酶切后的载体和目的基因片段通过DNA连接酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒需将其转入感受态的大肠杆菌中使其增殖。(2)根据质粒上抗性PCR鉴定目的基因DNA受热变性后解链为单链引物需要与单链两端相应互补序列结合故所用引物组成是图2中的引物甲和引物丙。(3)若酶切的DNA末端和酶切的DNA末端连接连接部位的6个碱基对序列为由于两种酶均不能4)根据、和的酶切位点在质粒上有三个酶切位点完全酶切可得到记为A、B、C三种片段若部分位点被切开可得到AB、AC、BC、ABC四种片段所以用切质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。[答案]　(1)和　DNA连接　感受(2)四环素　引物甲和引物丙(3)　都不能　(4)72．(2018·德州模拟)下面为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图据图回答下列问题： (1)a代表的物质和质粒的化学本质都是____________________二者还具有其他共同点如①________________________(写出两条即可)。(2)若质粒DNA分子的切割末端为则与之连接的目的基因切割末端应为________；可使用________把质粒和目的基因连接在一起。(3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为________________其作用是______________________________________________________________。(4)下列常在基因工程中