16RNA合成的生物合成和加工.pptVIP

转录单位 一个转录事件从起始点到终止点的DNA区间。 上游顺序：转录起始点左边的DNA顺序。 下游顺序：转录起始点右边的DNA顺序，转录起始点相应的DNA碱基对记为+1。 -10区和-35区：是大肠杆菌启动子结合的部位，通常在不同的细菌中具有相似性。 启动子：被RNA聚合酶识别、结合并开始转录的模板DNA的部位，称为启动子(promoter)。 Pribnow盒：大肠杆菌和其他相关细菌的绝大多数启动子中，-10区的交感顺序，具有5′TATAAT3′特征。 一、大肠杆菌的RNA聚合酶 核酶的发现，对中心法则作了重要补充； 核酶的发现是对传统酶学的挑战； 利用核酶的结构设计合成人工核酶。 逆转录病毒的生活周期蠖 端粒合成的一种模型 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 第六节 核 酶 具有酶促催化活性的RNA称为核酶。 核酶(ribozyme) 核酶研究的意义 不依赖于ρ因子的终止：这类终止子结构上有2个特征 （2）发夹结构末端紧跟6个连续的U，这 发夹结构阻碍了聚合酶的进一步延 伸，RNA链的合成就终止，酶和 mRNA就从模板DNA上释放。 （1）DNA链的3′端附近有回文结构，富含G-C碱基，随后紧跟的是A-T碱基， 转录而形成的RNA具有茎环的发夹形结构（hairpin structure） 。 依赖ρ因子（rho factor）的终止：ρ因子是ρ基因编码的蛋白质，是一种酶，它具有ATPase的活性和解链酶的活性，在水解ATP的情况下，它沿着5′→3′方向转录物的3′端前进，直到遇到暂停在终止点位置的RNA聚合酶。随后ρ因子通过解链酶的活性解开转录泡（transcription bubble）上的RNA/DNA形成的杂交双螺旋，使RNA转录物得到释放，从而终止转录。 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 第四节 真核生物与原核生物转录的主要区别 1. 真核细胞RNApol种类较多，根据它们对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同分为RNA pol I 、II 、III， 它们是高度分工的，不同的RNA聚合酶负责合成不同 的RNA。 2. 真核启动子比原核启动子更复杂和更多样性，不同的RNA聚合酶有不同的启动子。 3. 原核细胞靠RNA pol本身可识别启动子，而真核细胞的RNApol无法识别启动子，要靠转录因子 (transcription factor,TF）识别启动子 ，有许多转录因子。 4. 原核细胞基因转录的产物大多数为多顺反子mRNA，这是由于原核转录系统中功能相关的基因共享一个启动子，它们在转录时，以一个共同的转录单位进行转录。而真核 细胞，每一种蛋白质的基因都有自己独立的启动子，所以真核细胞转录产物是单顺反子mRNA。 原核 真核 DNA A B C P 转录 mRNA A B C DNA P A P B P C 转录 mRNA A B C 5. 原核细胞是边转录、边翻译，两个过程几乎是同时进行的，而真核细胞转录和翻译在时间上和空间上都是分开的，转录在细胞核，翻译在细胞质。 6. 真核细胞中DNA与组蛋白结合在一起，形成染色质，后者进一步盘曲、折叠形成染色体，其中只有一小部分能转录。 7. 真核细胞被转录的产物要经过非常复杂的后加工。 8、原核生物RNA聚合酶可以被利福霉素和利链霉素抑制，真核生物RNA聚合酶被α-鹅膏蕈碱抑制。 第五节 新生RNA的剪接和修饰 RNA前体 （初级转录产物） 加工（断裂、修剪、修饰） 成熟RNA 真核细胞最初转录的产物是核内不均一RNA（HnRNA），是mRNA的前体。 HnRNA分子量不均一，大小不同，沉降常数20s～100s，组成上类似于DNA（类似于DNA的RNA，D-RNA），代谢很快，迅速合成和降解。 HnRNA分子很大，其中大约只有10%转变成mRNA，其余在转录后的加工过程中被降解掉。 一、mRNA前体的加工过程 原核细胞的mRNA通常没有转录后的加工过程。 （1）戴帽 （2）加尾 （3）剪接（splicing） （4）修饰：主要是链内腺苷的甲基化 1、HnRNA转变成mRNA的加工过程包括 （1）戴帽 （2）加尾 （3）剪接（splicing） pG-OH (ppG-OH, pppG-OH) U-OH GpU pGpA 第一次转酯反应 第二次转酯反应 UpA GpU 外显子1 内含子 外显子2 G-OH UpU pGpA 二、rRNA前体的加工过程：