高中生物人教版选修3现代生物科技复习 （共19张PPT）.ppt

选修3 技术总结 1、基因工程基本操作 2、植物组织培养 3、植物体细胞杂交 4、动物细胞培养 5、动物细胞核移植 6、动物细胞融合 7、单克隆抗体的制备 8、体外受精 9、胚胎移植 基因工程基本操作的四个步骤 1、目的基因的获取 2、基因表达载体的构建 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测与鉴定 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成 包括启动子、目的基因、终止子、标记基因 植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 动物：显微注射法（受精卵） 微生物：感受态细胞法 目的基因是否插入：DNA分子杂交技术 目的基因是否转录：分子杂交技术 目的基因是否翻译：抗原-抗体杂交技术 （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。 BamHI \HindIII amp （1）需用 限制酶。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。 BamHI \HindIII 氨苄青霉素 （1）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 。 （2）在 检测到人乳铁蛋白说明基因表达成功。 1.下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线 乳腺蛋白基因启动子 乳汁 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 植物组织培养的过程 （未分化） （分化） 原理： 植物细胞的全能性 ①有丝分裂。 ②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等，避光 薄壁细胞 高度液泡化 排列疏松、无规则 ①有丝分裂、细胞分化。 ②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等，需光 去壁 去壁 纤维素酶果胶酶 原生质体 植物细胞 原生质体融合 再生细胞壁 杂种细胞 去分化 愈伤组织 杂种植株 再分化 植物体细胞杂交过程示意图 植物细胞 离心、振动、电刺激、 聚乙二醇 细胞融合成功的标志 植物组织培养 优势：克服远缘杂交不亲和障碍 原理：植物细胞的全能性，膜具有一定流动性 动物细胞培养 取 的组织、器官 原代培养 （1-10代细胞） 传代培养（10-50代细胞） 单个细胞 加入液体培养液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白酶 接触抑制 遗传物质 没有改变 胰蛋白酶 无限传代（细胞系） 遗传物质 改变 动物血清 去核卵细胞（减II中期） 供体 细胞 重组细胞 重组胚胎 新个体 代孕母牛C 胚胎移植 卵细胞培养 无性繁殖 体细胞的核移植过程 高产奶牛A 供体细胞培养（10代以内） 含有促进细胞核全能性表达的物质 细胞核移植 原理：动物细胞核具有全能性 遗传物质来源：供体细胞核和受体线粒体 A细胞 B细胞 人工诱导 杂交细胞 动物细胞融合 电激、PEG、灭活病毒 原理：细胞膜具有一定的流动性 BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤） （一选）选择性培养基：获得杂交瘤细胞 获得产生相应抗体的B细胞 （抗体检测）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 单克隆抗体的制备 杂交瘤细胞特点：既能无限增殖，又能产生特异性抗体。 单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。