DNA适配子生物传感器的设计和研究19.pptVIP

DNA适配子生物传感器的设计和研究 1） 生物传感器中的识别元素是决定传感器特异性的主要因素； 2） 而识别元素与靶分子的亲和力，以及换能器和检测仪表的质量 则很大程度上决定了传感器的灵敏度和响应速度。 生物传感器：集现代生物技术和先进物理技术于一体，是物质在分子水平的快速、微量分析检测器件。 识别体系 靶分子 仪表 换能器 信号探针 研究背景 实现 检测 识别 元素 适配子(aptamer)／靶分子 概念：核酸适配子(适体)是指利用指数富集的配体系统进化（SELEX）技术在体外从人工合成的随机寡核酸文库中筛选获得的能够与靶分子特异结合的寡链DNA或RNA分子，其靶向目标可以是金属离子,小分子,蛋白质等大分子,还可以是整个细胞。 新型识别元素： 体外筛选，分子较小,　易人工合成 　　亲和力高，特异性强 　　 　发生形变，可反复变性、复性 靶分子范围广 　稳定性好，容易制备及修饰 基本优点 理想识别元素 独特优势 设计灵活、简便 适配子的优点: 工作介绍 1.基于碳纳米管的三磷酸腺苷的适配子传感器及其在细胞分析中的应用 2.碳纳米管与DNA杂交荧光传感器灵敏的检测汞离子 基于碳纳米管的三磷酸腺苷的适配子传感器及其在细胞分析中的应用 实验原理示意图 碳纳米管对荧光强度的影响 适配子在（a）0，（b）2.0，（c）4.0，（d）6.0，（e）8.0和（f）10.0μg/ml碳纳米管存在时的荧光发射光谱，插图为荧光强度与碳纳米管浓度的线性关系。 不同条件下的荧光光谱 （a）适配子，（b）适配子+300nM三磷酸腺苷，（c）适配子+碳纳米管和（d）适配子+碳纳米管+300nM三磷酸腺苷的荧光发射光谱，激发波长480nm。 适配子（50nM）在不同情况下（a）适配子，（b）适配子+2.0mg/ml单壁碳纳米管（c）适配子+50μM三磷酸腺苷+2.0mg/ml单壁碳纳米管的圆二色光谱。 圆二色谱图 三磷酸腺苷浓度从10nM到6.4μM的荧光强度与浓度对数的关系图，插图为荧光强度与浓度对数的线性关系。 线性关系 线性范围： 10-800nM 检测限：4.5nM 在适配子-碳纳米管中存在三磷酸腺苷（600nM）、三磷酸鸟苷（1.2μM）、三磷酸胞苷（1.2μM）和三磷酸尿苷（1.2μM）各自的荧光强度变化图。 选择性 （a）适配子在新破解细胞溶液中，b）适配子-碳纳米管在新破解细胞溶液存在和（c）适配子-碳纳米管在放置24小时后的破解细胞溶液存在的荧光光谱图。 细胞试验 碳纳米管与DNA杂交荧光传感器灵敏的检测汞离子 实验原理示意图 紫外-可见吸收光谱图 不同条件的荧光光谱 （a）ssDNA和（b）ssDNA+单壁碳纳米管的紫外-可见吸收光谱。 （a）ssDNA，（b）ssDNA+ 4.0 μM Hg2+ ，（c）DNA+碳纳米管和（d）ssDNA+碳纳米管+ 4.0 μM Hg2+的荧光发射光谱。 紫外-可见吸收光谱图 圆二色谱图 二者共同验证了双链DNA的形成 （a）ssDNA+碳纳米管和（b）ssDNA+单壁碳纳米管+ Hg2+的紫外-可见吸收光谱。 （a）ssDNA+40.0μg/ml单壁碳纳米管（b） ssDNA+40.0μg/ml单壁碳纳米管+ Hg2+的圆二色光谱。 线性关系 选择性 Hg2+浓度依次为0, 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0 和 8.0 μM的荧光光谱图，插图为荧光强度与浓度对数的线性关系。 检测范围： 0.05- 8.0 μM 检测限： 14.5 nM Hg2+浓度为4.0 μM，其它金属离子浓度均为50 μM时的荧光强度差别。 Thank you for your attention ！