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中学联盟江苏省南京溧水区第三高级中学人教版高中生物选修3:1.4蛋白质工程的崛起课件共27张PPT
蛋白质是一切生命活动的体现者。 基因控制蛋白质的合成 第三节 蛋白质工程 1、基因工程的应用 (1)基因工程的实质:将一种生物的 转移到另一种生物体内,使后者产生本不能产生的 ,进而表现出新的 。 (2)基因工程的不足:在原则上只能生产自然界已存在的 。 2、天然蛋白质的不足 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的,它们的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 3、蛋白质工程的目的 生产符合人类生产和生活的需要的 。 思考:蛋白质工程崛起的缘由? 基因 蛋白质 性状 蛋白质 蛋白质 一、蛋白质工程的概念和原理 1、蛋白质工程的概念 通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构与功能,并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组技术DNA技术改造基因,以定向改造天然蛋白质,甚至创造自然界不存在的蛋白质的技术。 基因工程一般只能生产自然界中已存在的蛋白质,不一定满足人类的需要。 如:改造干扰素和提高玉米赖氨酸含量 对天然蛋白质进行改造,你认为应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现? 答:毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造,主要原因如下: (1)任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。 (2)对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作,难度要小得多。 蛋白质工程一般是先创造出适合人类需求的新基因,然后表达具有特定结构和功能的蛋白质。 关键技术:基因工程 蛋白质工程称为第二代基因工程 前提:了解蛋白质的结构和功能的关系 空间结构的测定: X射线晶体衍射法:三级结构 核磁共振 :了解其构想 ( 一级结构的测定(氨基酸序列)) 2、蛋白质工程的基本原理 基本原理:基因改造(基因修饰和基因合成) 流程: 预期蛋白质功能→设计出预期的蛋白质结构→推测应用的氨基酸序列→设计DNA的脱氧核苷酸序列(基因改造)(基因工程) 蛋白质工程的流程图 基因 DNA 氨基酸序列多肽链 蛋白质 三维结构 预期功能 生物功能 mRNA 转录 翻译 折叠 DNA合成 分子设计 中心法则 蛋白质工程 某多肽链的一段氨基酸的序列是···—甲硫氨酸—色氨酸—苯丙氨酸—色氨酸—··· (部分氨基酸的密码子是:甲硫氨酸—AUG,色氨酸—UGG,苯丙氨酸—UUU/UUC) 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。 TAC ACC AAA ACC 或 TAC ACC AAG ACC ATG TGG TTT TGG ATG TGG TTC TGG 蛋白质的改造(对蛋白质改造部位的多少) 大改:设计并制造自然界中不存在的全新蛋白质,使之具有特定的氨基酸序列、空间结构和预期功能 中改:在蛋白质分子中替代某一个肽段或一个特定的结构域 小改:通过基因工程中的定点诱变技术,有目的改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸殘基,以改善蛋白质的性质和功能 PCR技术是基因定点诱变的常用方法 利用人工合成带有突变点的诱变引物,通过PCR扩增而获得定点突变的基因,再通过基因工程的方法,将突变基因导入受体细胞,经过转录和翻译合成所需的蛋白质。 基因的定点诱变技术是改变蛋白质结构的核心之一 异亮氨酸 半胱氨酸 胰岛素改造 天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚体,延缓胰岛素从注射部位进入血液,从而延缓了其降血糖作用,也增加了抗原性,利用蛋白质工程技术将胰岛素B链由B28脯氨酸-B29赖氨酸改为B28赖氨酸-B29脯氨酸,则可降低其聚合作用,使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。 非定点诱变: 对蛋白质的空间结构不完全了解时,采用非定点诱变改造蛋白质,不具有目的性和针对性,可产生意想不到的结果 二、蛋白质工程的应用 1、改造酶的结构,有目的地提高酶的热稳定性 提高酶的稳定性方法: ①改变氨基酸(如酵母菌的丙糖磷酸异构酶) 天门冬酰胺—转变为—苏氨酸 天门冬酰胺—转变为—异亮氨酸 稳定性提高50% ②引入二硫键 2、制药领域 例1:鼠——人嵌合抗体的形成 鼠源杂交瘤抗体,对癌细胞有一定的杀伤能力,但对人体的不良反应较多。因而在基因水平上对抗体进行重组,产生人恒定区和可变区嵌合体,对人体的不良反应减少。 例2 纤维蛋白溶解酶原激活因子(t-PA) 保证血液流动畅通,但易与抑制剂形成复合物。 天门冬酰胺—
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