新ES胚胎干细胞.pptVIP

胚 胎 干 细 胞 王 锋 王 子 玉 逸夫楼3084 南京农业大学动物胚胎工程技术中心 内 容 囊 胚 二、干细胞的概念 2、分类 （1）全能干细胞，包括：胚胎干细胞（embryonic stem cells, ES细胞）生殖干细胞（embryonic germ cells, EG细胞） 具有全能性，能够分化成所有细胞类型， 进一步形成机体的任何组织和器官。 （2）多能干细胞：具有分化成多种细胞和组织的潜能，但却失去了发育成完整个体的能力。 （3）专能干细胞：只能向一种或密切相关的两种类型的细胞分化。 干细胞是一种能够分裂成与自身一致的细胞或几种特殊分化的细胞型的细胞。 动物体内干细胞的正常作用是在发育的过程中可提供不同的细胞型,以生长成不同的组织和器官。它们也提供替代细胞以修复身体不同部分的损伤。 干细胞疗法就是利用已特殊分化的干细胞,通过特殊的途径提供细胞去替代那些在退行性过程和损伤中失去的细胞。 使用未分化干细胞也存在畸胎瘤和其他肿瘤形成的风险。 目前人干细胞的主要来源或者潜在来源如下: ①胚泡,可以提供多能干细胞; ②胎儿组织,可以提供多能或者专能干细胞; ③脐带血,可以提供专能干细胞; ④成人组织,可提供专能干细胞或单能干细胞。 三、胚胎干细胞 1、概念 胚胎干细胞 (embryonic stem cells,ESC)是一种从早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞经分离、体外培养、克隆等得到的具有发育全能性的细胞。 两个主要特性：无限增殖而不分化、发育全能性。 这种细胞具有与早期胚胎相似的分化潜能和正常二倍体核型，因此兼有早期胚胎卵裂球及体细胞的某些特性。 ES细胞的全能性（totipotenty），是指ES细胞在解除分化抑制的条件下能参与包括生殖腺在内的各种组织的发育潜力，即ES细胞发育成完整动物体的能力。其实质是细胞基因组中决定蛋白质编码的所有基因按一定的时空顺序依次表达。 ES细胞是能在体外大量增殖的全能性细胞，可以为细胞的遗传操作和细胞分化研究提供丰富的实验材料。 2、ES细胞研究发展史（未讲） 1981年，英国剑桥大学的Evans和Kaufman用囊胚内细胞团(ICM)建立小鼠ES细胞系 1998年美国Thomson从人的体外受精囊胚中分离得到了ES细胞。同年约翰霍普金斯大学的Shamblott等从人的PGC细胞中分离得到人的全能性干细胞。 人ES细胞的分离成功给人类的基因治疗和器官移植打下了基础。 其他动物只获得了类ES细胞。 1999年12月，美国《科学》杂志公布了当年世界科学进展的评定结果，干细胞的研究成果列在举世瞩目耗资巨大的人类基因组工程之前，名列十大科学进展首位。 2002年3月，美国麻省理工学院的科学家宣布，他们首次利用人体胚胎干细胞培育出毛细血管，证明了胚胎干细胞技术在治疗心血管疾病等领域的应用潜力。 目前已有报导ES细胞能在适当条件下分化为心肌细胞，胰岛细胞，血管内皮细胞，肝细胞等。 3、胚胎干细胞的性质 衍生自囊胚的内细胞团或原始外胚层的细胞； 永生化(immortal)； 能维持稳定的正常的二倍体染色体结构； 有稳定的发育潜能，能被诱导增殖或分化； 能参与胎儿所有组织的发育过程； 4、胚胎干细胞系的建立过程 胚胎干细胞检测指标 (1) 细胞内碱性磷酸酶活性高 (2) 端粒酶活性高 (3) 不被Hoechst33342 和Rhodamine123染色 (4) 细胞膜表面有特殊的标记：SSEA-3, SSEA-4, 　 TRA-1-60, TRA-1-81。 (5) 能分化成三个胚层的细胞，将胚胎干细胞植 　 入免疫缺陷小鼠皮下可产生畸胎瘤 (6) 可诱导分化为各种成体干细胞 小鼠胚胎干细胞注射体内形成的畸胎瘤(左侧膨大部位) 畸胎瘤 畸胎瘤组织学切片 四、 ES细胞的应用前景 胚胎干细胞（ES）成为当今生命科学和生物技术研究的热点。这与它具有“发育全能性”的神奇功能密切相关。 能分化成人体200多种细胞类型，形成机体的任何细胞、组织和器官。 倘能掌握其分化发育的规律，在人工条件下定向分化为所需的细胞、组织乃至器官，就可以用来治疗目前还难以或无法治愈的帕金森氏病、早老性痴呆、白血病、糖尿病等顽症，并且解决十分紧缺的组织和器官移植的来源问题。 进一步，与克隆技术相结合，运用体细胞核转移技术来得到ES，还能解决细胞治疗以及组织和器官移植的免疫排异难题。　 ES细胞特有的生物学特性,决定了其在生物学领域有着不可估量的应用价值。在进行ES细胞建系和定向分化的同时,以ES细胞为材料，在核移植、嵌合体、转基因动物研究等方面也进行了广泛的尝试,已经充分体现出ES细胞在加快良种家畜繁育、生产转基因动物