应激--糖皮质激素--脂氧素a4轴介导自然流产及其作用机制的研究-妇产科学专业论文.docxVIP

温州医学院博士学位论文应激一糖皮质激素一脂氧素M轴介导自然流产及其作用机制的研究中文摘要目的：自然流产是妊娠最常见并发症，涉及多种可能的病因，但其发生的分子机制 仍是雾里看花。妊娠是炎症介导的过程，成功的妊娠依赖于母胎界面的抗炎因子 和促炎因子微环境的平衡。妊娠炎性微环境稳态一旦打破，可能促发自然流产。 脂氧素A4是调节炎症反应的“刹车信号和维持机体内环境的稳定的重要介质。 本课题提出自然流产发生的“应激．糖皮质激素．脂氧素A4轴”的分子机制和脂氧 素A4可能是治疗自然流产的潜在策略，为早期自然流产发病机制的研究开拓新视 野，为自然流产防治策略的制定提供新思路和理论依据。方：法：从临床和动物实验两方面论证自然流产发生的“应激一糖皮质激素一脂氧素A4 轴”的分子机制的假说收集正常妊娠和自然流产妇女血液和绒毛组织，酶联免疫吸附试验检测脂氧 素A4和糖皮质激素水平；RT-PCR、实时聚合酶链反应、免疫组化检测5．脂加氧 酶、12一脂加氧酶、15一脂加氧酶、1113．羟甾脱氢酶1／1113．羟甾脱氢酶2及炎症相关 因子的mRNA和蛋白水平，从临床方面探讨“应激．糖皮质激素．脂氧素A4轴”诱 导自然流产的作用及机制。构建各种应激诱导自然流产及脂氧素A4治疗自然流产的小鼠模型，酶联免疫 吸附试验检测脂氧素A4和炎症相关因子；时聚合酶链反应、免疫组化检测5．脂加 氧酶、12．脂加氧酶、15一脂加氧酶、11D．羟甾脱氢酶1／1113一羟甾脱氢酶2及炎症相 关因子的mRNA和蛋白水平；肥大细胞染色并定量；芝加哥天蓝染色观察子宫内 膜血管通透性；从动物方面论证自然流产发生的“应激一糖皮质激素-脂氧素A4轴” 的分子机制的假说。温州医学院博士学位论文结果： 1．自然流产妇女和LPS诱导的小鼠自然流产均出现脂氧素A4及其合成酶表达下降：自然流产妇女血清和绒毛组织脂氧素A4水平显著低于正常妊娠妇女(P0．001)，绒毛组织12．LO，15．LO表达明显下降；LPS诱导的小鼠自然流产 血清脂氧素A4水平显著低于正常妊娠小鼠(P0．01)，胎盘组织12．LO，15．LO 表达也明显下降。2．脂氧素A4保护LPS诱发的小鼠自然流产：LPS诱导小鼠自然流产后给予脂氧 素A4治疗，很好地维持孕鼠体重增长，挽救了LPS导致的胚胎吸收，显著增 加能存活的胚胎种植数目(PO．001)，显著降低流产率和胚胎吸收率(尸 0．001)。3．阻断脂氧素信号通路诱导小鼠自然流产：N．Boc．Phe．Leu．Phe．Leu—Phe(BOC) 阻断脂氧素A4信号通路出现小鼠阴道出血，体重减轻，胚胎吸收或无胎鼠出 生。4．脂氧素A4对抗妊娠早期LPS的促炎效应：LPS诱导小鼠自然流产后给予脂氧 素A4治疗，脂氧素A4通过调节妊娠局部炎症相关因子(下调iNOS，CCL2， TGF．p，IFN吖和IL．6，上调IL一10)和抑制妊娠局部肥大细胞迁移而保持妊娠 炎性微环境的动态平衡。5．糖皮质激素介导脂氧素A4水平下降：不同浓度地塞米松作用孕鼠，低浓度 (0．5mg／kg)短时间使用对小鼠妊娠无影响，随着浓度的增加，地塞米松诱发 小鼠自然流产，并且出现脂氧素A4和其合成酶5-LO，12一LO，15．LO表达下 降。6．自然流产时糖皮质激素活性通过1113．HSDl／1113．HSD2途径调节：正常妊娠和 自然流产妇女血清糖皮质激素水平比较，无显著性差异(尸0．05)，但是各种 应激(细菌感染、病毒、缺氧)诱发的小鼠自然流产和人类自然流产与正常妊 娠比较，均出现胎盘11[3-HSD2表达急剧下降，而1113一HSDl表达无影响，因 此通过降调胎盘11p-HSD2表达，增强妊娠局部糖皮质激素活性，放大其效应。4温州医学院博士学位论文 结论：我们提出自然流产发生的“应激．糖皮质激素．脂氧素A4轴”的分子机N-受 精卵着床后，各种内在或外在的应激超过阈值，降调胎盘11B．羟甾脱氢酶2表达， 增强妊娠局部糖皮质激素的活性，糖皮质激素活性增强导致脂氧素A4生成障碍， 即炎症“刹车”系统发生故障，干扰正常妊娠炎症微环境，妊娠的促炎因子和抗炎因 子微环境失衡，促发自然流产。关键词：自然流产；1113一羟甾脱氢酶111113-羟甾脱氢酶2；糖皮质激素；脂氧素A4； 炎症温州医学院博士学位论文Spontaneous miscarriage is explained by stress／glucocoticoid／lipoxin A4 axisAbstractobjectiveSpontaneous miscarriage is one of the most common complications of pregnancy． Despite various suspected causes from end