compound 4880对apoe基因敲除小鼠颈总动脉套环诱导斑块影响.pptVIP

从表1数据可以看出，实验组血清各脂质含量与对照组相比， p＞0.05，无显著性差异，可见Compound 48/80对血脂含量无明显影响，但该数值与apoE基因敲除小鼠正常血脂值比较，已明显升高，说明高脂高胆固醇饲料喂养已造成高脂高胆固醇血症。 * 类胰蛋白酶不仅是肥大细胞分泌颗粒中含量最多的酶，而且由于未能在机体其它细胞中检测出类胰蛋白酶的存在，类胰蛋白酶成为鉴定肥大细胞的特异性标志。表2中，实验组血清类胰蛋白酶活性高于对照组 ，两者有显著性差异，表明Compound 48/80通过刺激肥大细胞脱颗粒，升高了血清类胰蛋白酶活性。 * 通过甲苯胺蓝染色进一步观察肥大细胞脱颗粒状况。A为对照组…….B为实验组…….通过计算脱颗粒的肥大细胞占肥大细胞总数的百分率，作出柱形图，可以看出，实验组明显高于对照组，两组相比p＜0.05，可见Compound 48/80刺激颈总动脉外膜肥大细胞脱颗粒。 * * * * * Compound 48/80对apoE基因敲除小鼠颈总动脉套环诱导斑块的影响 南华大学心血管病研究所 唐 雅 玲 * 肥大细胞与动脉粥样硬化 肥大细胞(mast cell,MC)来源于骨髓多能干细胞,主要位于结缔组织内,其主要特征为胞浆内含有大量异染性颗粒,颗粒中含有多种生物活性成分。 * 近年来对动脉粥样硬化斑块切除标本及尸检标本的研究表明，肥大细胞对动脉粥样硬化斑块的形成和发展起着重要作用。 * 本研究所已在细胞学水平，多方面探讨了肥大细胞促进动脉粥样硬化发生发展的机制，得到的主要结论有： 肥大细胞促进氧化低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞泡沫化； 肥大细胞抑制巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出。 * 到目前为止，有关肥大细胞与动脉粥样硬化关系的研究主要是病理学观察和细胞学实验。 本课题采用动物在体实验，将Compound 48/80作用于颈总动脉套环的apoE-/-小鼠，探讨肥大细胞脱颗粒对斑块特性（包括大小、细胞成分、血管新生和出血）的影响及其可能机制。 * 实 验 方 法 * 动物饲养 40只10周龄雄性apoE-/-小鼠，高脂高胆固醇饲料 （0.25％胆固醇＋15％猪油）饲养于SPF房中。 * 右颈总动脉套环术 * 实验分组 术后4周 随机分为两组，每组20只： 实验组 腹腔注射Compound 48/80 （0.5mg/kg） 对照组 腹腔注射相同体积的D-Hank，s 隔日一次，共4次，第4次注射后半小时，采血、安乐死处死小鼠。 * 原位灌流固定、取材 全自动生化分析仪测定血清中脂质含量 比色法测定血清中类胰蛋白酶活性 石蜡切片制作 苏木素－伊红染色 甲苯胺蓝染色 vWF、α-smooth muscle actin、Mac3、IL-1β免疫组织化学染色 bFGF mRNA原位杂交及免疫荧光检测 图像分析 、统计学分析 * 实 验 结 果 * Compound 48/80对血脂含量无明显影响 表1 血清脂质含量（mmol/L ） 组 别 TG TC HDL-C LDL-C ? 对照组 1.30±0.37 12.74±0.93 0.46±0.12 12.02±0.91 实验组 0.94±0.22 11.74±3.56 0.53±0.06 11.01±4.13 实验组与对照组相比，P＞0.05 * Compound 48/80升高血清类胰蛋白酶活性 表2 血清类胰蛋白酶活性（u/L） 组 别 类胰蛋白酶活性 对照组 0.36±0.10 实验组 0.57±0.13* *与对照组相比，P＜0.05 * Compound 48/80刺激颈总动脉外膜肥大细胞脱颗粒 对照组 实验组 甲苯胺蓝染色（10×100） *与对照组相比，P＜0.05 图1 Compound 48/80对套环侧颈总动脉外膜肥大细胞脱颗粒的影响 ? B A * 套环加速颈总动脉斑块形成、Compound 48/80增大套环侧颈总动脉斑块面积，并使套环侧颈总动脉狭窄程度加重 对照组未套环侧 实验组未套环侧 对照组套环侧 实验组套环侧 颈总动脉石蜡切片HE染色（10×20） *与同组未套环侧相比，P＜0.05, ﹟与对照组相比，P＜0.05 *与对照组相比，P＜0.05 图2 套环及Compound 48/80对颈总动脉斑块面积及狭窄程度的影响