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临床微生物实验室的质量控制 卫生部临床检验中心 胡继红 2006-03-20 山东 质量保证QA（Quality Assurance ） 质量保证 是实验室报告的质量得到保证的全过程 概括总结为：正确的结果是来自于从正确的样品采集的正确的标本；在正确的时间里得到的结果，结果的解释是基于正确的参考资料，当然还要考虑到价格的合理。在强调质量的前提下设计的步骤不能只限于实验室的技术操作步骤。 质量保证和质量控制的关系 质量保证和质量控制在目的方面很相似，但在含义和功能上是不同的。其功能是相互作用的关系，因为非常接近而通常被混淆。 质量保证比质量控制更难用“量”来限定，每个环节都将影响结果的质量。 对每个环节进行控制，构成质量保证体系。 质量保证和质量控制的关系 质量控制很少把实验室人员包括在内 质量保证是基于实验室和临床医生的对话。 质量保证体系 质量保证比质量控制更难用“量”来限定，因为它侧重实验室的检测对患者的影响 一个有效的质量保证体系帮助实验室说明，试验数据不是凭空产生的，实验室做的一切最终会对患者的生命产生影响 ,对患者的生命负责。 得到正确分析结果的基础 标本分析前的质量控制 — 微生物学特殊方面 ?大量的分析前因素影响微生物实验的诊断价值 合理的标本采集 向临床提供标本采集说明(sop)，包括正确时间、部位和方法等 正确的运送方式 包括运送工具和有效时间及储存方法等 有可靠的标本质量评价方法 拒收标本指标 除非不能再采集的标本，否则不予检测；如果培养或检测，要对结果进行说明。 收集和运送微生物标本的容器要求 无菌 无防腐剂 足够大 安全严密 不易碎 运送培养基 加强无生长因子或保持特定菌的培养基 避免用木质的棉试子对细菌有毒害 拭子标本 拭子标本在运送过程中应防止干燥，可将拭子放进液体肉汤或运送培养基中。 为防止标本中的细菌数量减少，标本量应尽可能大。 运送时间及运输贮存温度 标本因冷藏及pH改变或在氧气中暴露，可能减少很多种细菌的存活时间 脑膜炎球菌，淋病奈瑟菌，流感嗜血杆菌，肺炎链球菌，布氏杆菌，沙门菌，志贺氏菌，霍乱弧菌，空肠弯曲菌及厌养菌 定量评价细菌数的培养（尿标本） 对环境敏感菌株在运送中数量快速减少时，如果运送时间太长，其它菌则成倍增长，需要寻找的细菌可同其它菌一起过度生长。 需进行细菌学检测的所有标本，应在收集后2小时内送到实验室 细菌学试验的各种标本的运送及贮存条件 培养葙、水浴和冰箱可接受温度范围 定期维护和校准、记录 pH计 厌氧指示剂 水浴葙 天平 加样器 自动高压灭菌器 生物安全柜 成品商业培养基 接收时记录批号，接收日期； 厂家提供质控文件，如实沿用气体，培养时间长度，可接受的结果； 使用的实验室必须检查外观，破损、污染、溶血或冻坏情况； 有效期内质量是否有变化 必须做质控的商业培养基 做药敏试验 MH培养基 巧克力琼脂 弯曲菌琼脂 淋球菌选择培养基 用于主要的微生物鉴定 试剂盒中的培养基有两种或更多的底物 有相对高的失败率 厂家不做的羊血琼脂CAMP 细胞培养用 自制培养基 每批做质控用菌株根据期望结果选择 确认要求生长特性（溶血、特征菌落等） 选择性（生长/不生长） 加强营养（苛养菌） 鉴定用生化反应（阴性、阳性，如：氧化/发酵，动力等） 质控菌株的贮存 日常用：4-8 ℃,胰酶消化大豆肉汤（非苛养菌）；高营养巧克力琼脂斜面（苛养菌），每周转种。 中期贮存：50％胎牛血清肉汤，脱纤维羊血或脱脂牛奶，10-15％甘油胰酶消化大豆肉汤，-20℃。 长期贮存：冻干或液氮。 试剂 所有试剂(水、干燥培养基、菌株和药敏纸片) 必须标记成份、浓度、配制日期、接收日期、贮存地方、失效期和库存量。 按厂家要求保存试剂 过期试剂应该弃去 参考菌株用于检测所有菌株、试剂、阳性和阴性反应。 试剂质控 触酶（粪肠球菌、金葡菌） 凝固酶（金黄色葡萄球菌、表葡菌） 氧化酶（绿脓假单胞菌、大肠杆菌） Β-内酰胺酶 杆菌肽（A群链球菌） OP（肺炎链球菌S,草绿色链球菌R） X+V纸片（流感嗜血杆菌） 抗酸染色（快生长分枝杆菌） G染色（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌） 诊断抗血清 用已知阳性和阴性菌株做对照！ 抗生素药敏试验 纸片法 新批号药做；一般每周做； 失控时天天做，连续30天，准确度和精确 度达到后才恢复每天做； 一个药物失控时，重新测5天。 稀释法 琼脂法、微量肉汤法每次同时做质控 药敏试验失控措施 按美国NCCLS（CLSI)规定 (1)质控菌株应按标准方法与临床标本种分离菌同