- 1、本文档共18页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
蛋白质诱导表达及检测
蛋白质的检测 免疫印迹法 基于抗体可与目的蛋白特异性结合的原理. 转移 染色 封闭 加 一抗 洗膜 加二抗 洗膜 检测 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 蛋白质的诱导表达及检测 2004-06-10 刘 娜 * 蛋白质的检测 蛋白质的诱导表达 * 蛋白质的检测 Western blot(蛋白质印迹) 首先将蛋白质用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳按分子量大小 分开,在将蛋白质转移到NC膜上,膜上蛋白质的位置可以保持在 与胶相对应的原位上。然后,以蛋白质的抗体为探针,对目的蛋 白质进行定性或半定量分析。 * 蛋白质的检测 蛋白质样品的制备 SDS转移 染色 目的蛋白的检测 * 细胞或组织的裂解 细菌的裂解 蛋白质样品的制备 蛋白质的检测 * 蛋白质样品的制备 蛋白质的检测 细菌的裂解 2xSDS凝胶加样缓冲液 100mmol/L Tris.cl (PH 6.8) 200mmol/L DTT 4% SDS 0.2% 溴酚蓝 20%甘油 * 蛋白质的检测 SDSSDS(变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳) 是将分子筛效应和电荷效应结合在一起的 一种具有高分辨率的电泳方法. * 聚丙烯酰胺凝胶电泳 连续的凝胶电泳 不连续的凝胶电泳 蛋白质的检测 SDS* 不连续的凝胶电泳 蛋白质的检测 SDS上层胶(浓缩胶) 下层胶(分离胶) 浓度 PH 2%-6% 6.8 5%-20% 8.8 * 蛋白质的检测 SDS%聚丙烯酰胺(29:1的丙烯酰胺:双丙烯酰胺) 浓缩胶缓冲液(Tris cl PH 8.8) 分离胶缓冲液(Tris cl PH 6.8) 10%过硫酸铵 TEMED H20 凝胶的配制 * 样品的电泳 加热变性蛋白样品 加入Running Buffer(Tris cl,甘氨酸) 蛋白质的检测 SDS* 目的蛋白的检测 蛋白质的检测 SDS考马斯亮蓝染色法 免疫印迹法 * * * * * * * * * * * * * * * * * * *
您可能关注的文档
最近下载
- 外墙涂料作业安全技术交底.docx VIP
- 2024广西高质量共建“一带一路”谱写人类命运共同体新篇章公需课答案.docx VIP
- SND-智能开关型电动执行机构使用说明书-常州电站辅机股份有限公司.PDF VIP
- 校园零星维修服务方案.docx VIP
- 【医院管理分享】:全病程服务管理模式的构建与实践-湘雅医院实践.pptx VIP
- 线束图面制图标准.doc VIP
- 审计署审计项目全流程审计质量控制办法.docx VIP
- “双碳”背景下受端电网火电机组增加调相功能关键技术.docx VIP
- 陕西省重点研发计划项目申请书【模板】.docx VIP
- 【大猫英语分级阅读三级】RebeccaattheFunfair丽贝卡玩转游乐园.pdf VIP
文档评论(0)