林生地霉体内及体外药物敏感性研究.pdfVIP

中文摘要 1．1林生地霉感染动物模型的制作 将小鼠随机分为特比萘芬治疗组、两性霉素B治疗组、5一氟胞嘧啶治 疗组、氟康唑治疗组、伊曲康唑治疗组和未治疗组，每一小组又分为逆培 养阳性率观察组和组织载菌量观察组，通过给小鼠腹腔注射环磷酰胺的方 法，制作免疫低下小鼠模型，后将菌悬液通过腹腔注射的途径接种到小鼠 体内，制作成为林生地霉感染的动物模型【4】。 1．2给药途径及给药量 各抗真菌药物因为不同给药途径会导致在动物体内吸收率不同，所以 选择其吸收率最高的给药途径，结合药典给出的用药剂量，自菌悬液接种 2小时后给药，1天1次，连续5天【5】。 1．3组织真菌逆培养 给药结束后将小鼠处死，分离其脾脏组织，行组织真菌逆培养，计算 其各组逆培养阳性率，进行统计学分析。 1．4组织载菌量测定 将各组小鼠处死后解剖，将脾脏于组织研磨器中研碎，行组织载菌量 测定，并进行统计学分析。 2抗真菌药物对林生地霉MIC值的测定 2．1菌悬液的制备 将菌种复苏并转种后在无菌条件下，用生理盐水冲洗平面，在血细胞 计数板上计数，再用RPMI．1640液体培养基稀释，最终得到浓度为1～5 ×105cfu／ml的林生地霉菌悬液及质控菌株菌悬液作为接种物。 2．2抗真菌药物接种液的制备 根据NCCLSM27．A2方案，将各抗真菌药物分别溶解，配成各药物 的贮存液，保存于一20℃冰箱里备用，使用时常温下解冻并用RPMI一1640 液体培养基倍比稀释为10个递减浓度为药物的接种浓度。 2．3药液及菌悬液的接种 将递减浓度的各组药液依次加入96孔板的1～10列，将不含药物的 培养基加入11～12列，后将菌悬液依次加入1～11列中，同时在第12列 再加入液体培养基，即96孔板中1～10列为药物实验组，11列为生长对 照组，12列为空白对照组。在37。C恒温培养箱中培养5天后读取数据。 2．4结果判读 万方数据 中文摘要 结合NCCLS M27．A2方案给出的建议，判读5种抗真菌药物对受试 菌及质控菌的MIC值，将测得的质控菌的MIC值与其参考范围进行对比， 在参考范围内才可认为实验有效，并将实验数据进行统计学处理。 结果： 1动物体内药敏实验 1．1组织真菌逆培养阳性率比较 特比萘芬治疗组、两性霉素B治疗组及5．氟胞嘧啶治疗组与未治疗 组比较均有明显差异(尸O．05)，而氟康唑治疗组及伊曲康唑治疗组的逆 培养阳性率与未治疗组比较无明显差(胗O．05)；其中，特比萘芬组阳性 3)。 率较其他组均低，两两比较均有显著性差异(PO．05)(Table 1．2组织载菌量比较 特比萘芬治疗组、两性霉素B治疗组、5．氟胞嘧啶治疗组及氟康唑治 疗组与未治疗组脾脏载菌量比较，载菌量均较低，有明显差异(PO．05)， 而伊曲康唑治疗组与未治疗组载菌量比较，无明显差异(尸O．05)；特比 萘芬治疗组与5一氟胞嘧啶治疗组、氟康唑治疗组比较，载菌量最低，有明 显差异(尸0．05)；5．氟胞嘧啶治疗组与氟康唑治疗组小鼠脾脏载菌量比 4)。 较，无明显差异(尸0．05)(Table 2抗真菌药物对林生地霉的MIC值(u g／m1) 特比萘芬：O．01、两性霉素B：0．4、5一氟胞嘧啶：2、氟康唑：2．69、 伊曲康唑：0．25。林生地霉对它们的敏感性分别为：对特比萘芬、两性霉 素B、5．氟胞嘧啶、氟康唑均为敏感，对伊曲康唑为剂量依赖性敏感(Table 5)。 结论： 1特比萘芬、两性霉素B及5．氟胞嘧啶均可有效降低林生地霉感染 的脾脏组织逆培养阳性率，其中以特比萘芬效果最强，而氟康唑和伊曲康 唑则无明显作用。 2特比萘芬、两性霉素B、5。氟胞嘧啶及氟康唑均可显著降低林生地 霉感染的脾脏组织载菌量，其中以特比萘芬效果最为显著，而伊曲康唑在 降低脾脏组织载菌