自来水中的三种磺胺类抗生素的测定1原理2试剂及标准-东西分析.PDF

自来水中的三种磺胺类抗生素的测定 1. 原理 自来水中的磺胺类药物通过固相萃取柱富集 ，用甲醇洗脱 ，浓缩后经 C18 柱分离。根 据保留时间定性 ，外标法定量。 2. 试剂及标准溶液配制 2.1 试剂 2.1.1 乙腈 （HPLC级 ） 2.1.2 去离子水 ，0.45μm滤膜过滤 2.1.3 磺胺嘧啶标准物质 ：纯度均大于 99% 2.1.4 磺胺二甲基嘧啶标准物质 ：纯度均大于 99% 2.1.5 磺胺甲恶唑标准物质 ：纯度均大于 99% 2.1.6 乙酸 （分析纯 ） 2.2 标准溶液配制 2.2.1 0.025g 25mL 磺胺嘧啶储备液的配制 ：准确称取磺胺嘧啶标准品 于 容量 瓶中 ，用乙腈溶解并定容 ，配制成 1000µg/mL储备液。 2.2.2 磺胺二甲基嘧啶储备液的配制 ：准确称取磺胺二甲基嘧啶标准品 0.025g 于 25mL容量瓶中 ，用乙腈溶解并定容 ，配制成 1000µg/mL储备液。 2.2.3 磺胺甲恶唑储备液的配制 ：准确称取磺胺甲恶唑标准品 0.025g于 25mL 容量瓶中 ，用乙腈溶解并定容 ，配制成 1000µg/mL储备液。 2.2.4 三种标准溶液的配制 ：将上述三种标准储备液进行适当倍数的稀释 ，配制成浓度分 0.25 0.5 1.0 2.0 5.0µg/mL 别为 、 、 、 、 的三种标样的混合标准溶液。 3. 仪器及工作条件 3.1 仪器 - 1 - 3.1.1LC5510高效液相色谱仪 （北东西分析仪器有限公司 ）。 3.1.2 DM-100在线脱气机 （北东西分析仪器有限公司 ）。 3.1.3 氮吹仪 3.1.4 0.45 μm 滤膜 ： 。 3.1.5分析天平 ：感量为 0.0001g 3.2 色谱条件 C18 5μm 250 mm×4.6mm 色谱柱 ： 柱 ， × 。 流动相 ：乙腈+1%醋酸水溶液 25+75 流速 ：1.0mL/min。 检测波长 ：270nm。 柱温 ：35℃。 进样量 ：20 μL。 4. 分析步骤及分析结果 4.1 试样处理 取 200mL水样 ，经 0.45μm滤膜过滤。HLB固相萃取柱依次用 5mL甲醇、5mL去 离子水活化。将样品以 1滴/S的速度通过固相萃取柱 ，待全部通过后再用 5mL去离子水 进行淋洗 ，抽干。最后用 5mL甲醇洗脱。将洗脱液在 40℃下用氮吹仪吹至近干 ，用 1mL 流动相溶解 ，待测。 4.2 测定 4.2.1 标准曲线的绘制 将标准系列工作液依次按上述色谱条件上机测定 ，记录色谱峰面积。以峰面积为纵坐标 ， 浓度为横坐标 ，绘制标准曲线。 - 2 - 图 1 磺胺嘧啶标准曲线 浓度 （µg/mL） 0.25 0.5 1.0 2.0 5.0 线性方程 Y 24377.50X+1887.78 相关系数 0.9999 图 2 磺胺二甲基嘧啶标准曲线 浓度 （µg/mL） 0.25 0.5 1.0 2.0 5.0 线性方程 Y 23002.58X+932.88 相关系数 0.99997 - 3 -