遗传学精品教程（中国医科大学）第九章 基因操作-4h.pptVIP

第九章 基因分析技术 中国医科大学 基础医学院医学遗传学教研室 本 章 重 点 重组DNA技术 限制性内切酶：命名、识别顺序、切口（平/粘末端） 载体（vector）概念、条件、常用载体 克隆(clone)的概念及主要步骤 PCR概念、原理、步骤、应用 分子杂交： 探针的概念 探针标记方法: 缺口平移法、随机引物法 Southern Blot:原理、步骤、应用 Northern Blot：原理、步骤、应用 DNA多态: RFLP，VNTR，STR，微卫星DNA 20世纪70年代以来,依赖于分子遗传学的进步，分子生物学技术迅速发展,使人类对人类基因组及单个基因的结构、功能、变异的研究成为现实。本章就一些常用基因工程相关的分子生物学技术予以介绍。 第一节 重组DNA技术——基因工程 重组DNA技术（Recombinant DNA Technique） 人类根据需要选择目的基因（或DNA片段）在体外与基因运载体重组，转移至另一细胞或生物体内进行扩增、表达，得到大量相同的DNA片段或表达相应的基因产物，以达到改良和创造新的物种和治疗人类疾病的目的。 该技术的发展和应用，关键在于限制酶的发现和应用。 一、限制酶和连接酶 特异性切断DNA链中磷酸二酯键 是重组DNA等技术所需的一类重要工具酶。 发现于原核生物体内，现已分离出10