基于伪型病毒的猪瘟中和抗体检测方法的初步建立及猪瘟病毒e2蛋白的细胞定位研究-预防兽医学专业论文.docx

下载文档 降价啦

7
0
约9.03万字
约 81页
2018-05-10 发布于上海
举报
版权申诉
保障服务

基于伪型病毒的猪瘟中和抗体检测方法的初步建立及猪瘟病毒e2蛋白的细胞定位研究-预防兽医学专业论文.docx

1、本文档共81页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。

基于伪型病毒的猪瘟中和抗体检测方法的初步建立及猪瘟病毒e2蛋白的细胞定位研究-预防兽医学专业论文

EstablishmentofanAssaybasedonPseudotypeVirusforDetectionofNeutralizingAntibodiesagainstClassicalSwineandLocalizationofE2ProteinintheInfectedCellsAbstractClassicalswinefever(CSF)causedbytheClassicalswine fevervirus(CSFV)is animportantconlagiousandfatalpigdiseasewithwidespread economic losses.Vaccinationisofvilalimportanceasaneffectivewaytotheprevention01CSFVinfection，soilisessentialtoestablishastableandeffectiveneutralizingantibodydetectiontotesttheCSFvaccll1e.PseudotypeCSFV(VSV6G*CSF)referstotheprocessinwhichtheenvelopedproteingene(G)wasreplacedbythegreentluorescentprotein(GFP)geneandVSV6G*wasformed，containinganewrep0l1ergene.CSFVenvelopeproteinfromexlemalsourcescanreassemblewithVSV6G*andintegrateintoaone-offinfectiousVSV(VesicularStomatitisVirus) recombinantvirus:VSV6G*CSF.VSV6G*CSFcontainsthegeneticmaterialofVSVandthecapsulemembraneintegratedwithlhecharacteroftheinfectionofCSFVenvelopeprotein.Thiskindoftheinconsistencybetweengenolype andphenotypeiscalledpseudo-type，withsuchfeaturesofCSFViscalledpseudotypevirusofCSFV.ln this study，we constructed a recombinant eukaryotic expression plasmidpCAGG-EO12toexpressallofCSFVenvelopeproteinsEr邸，ElandE2 bycis.AccordingtolhebovineviraldialTheavirusenvelopeglycoproteinE2and 10partiallydeletethedifferentfragmentsbyusingthebiologysoftwaretocompareandanalysis.TheresultoftheexpressionindictedthatafterthecisexpressionofallCSFVenvelopeglycoproteinsbased ontherecombinant eukaryoticexpressionplasmidpCAGG-E012，thetiterofVSV6G*CSFisfrom102to103?mL-\andtheinfectioncanbeneutralizedwiththeposiliveserumantiCSFVThe traditional methods for detecting CSF antibody Iike ELISA and indirectimmunotluorescenceassayhaveaseriesoftlawsinurgentneedofimprovement，suchastime-consuming，impreciseandlowspecificity.Inordertoimprovetheefficiencyof neutralizingantibodydetectionandbiologicalsafety，andthentostudythemechanismofCSFVinfection，thisstudydevelopedareplication-defective VSV/CSFV pseudovirus(VSV6G*CSF)，asamodelofCSFVinfectiontoreplacethewild-typeCSF