扰动剪切流场对内皮细胞小窝蛋白再分布和表达量及no合成的影响-生物制药工程专业论文.docxVIP

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2018-05-10 发布于上海
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扰动剪切流场对内皮细胞小窝蛋白再分布和表达量及no合成的影响-生物制药工程专业论文.docx

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扰动剪切流场对内皮细胞小窝蛋白再分布和表达量及no合成的影响-生物制药工程专业论文

ABSTRACTManystudieshavedemonstratedthatatheroscleroticlesions developprimarilyatsitesofdisturbedoralteredbloodflow,suchasatbifurcationsofbloodvessel.Thecaveolin-1servesasthestructuralcomponentsofcaveolae,whilealsofunctioningasscaffoldingproteins,capableofrecruitingnumeroussignalingmoleculestocaveolae,aswellasregulatingtheiractivities.Thoughpreviousstudieshavesuggestedthatcaveolaeandendothelialcaveolin-1mayregulatethevascularresponsetoalteredshearstress,itisnotenoughtoexplaintheimportanceofcaveolin-1ininducingatheroscleroticlesionsespeciallyunderdisturbedshearstress.Inordertostudydistributionandexpressionofcaveolin-1under disturbedshear stress,weestablishedanovel PDMS-basedvertical-stepflowchambertosimulatethebloodflowfeaturesoftheASpredilectionsiteinvitro.ThecatalyticsitesofeNOSmainlylocatedatthemembraneofthecaveolaeandhavetheconjunctivesequenceforCav-1,NOwhichis theproductofeNOS isthekeyregulationfactor ofbloodvesselinternalenvironment.Therefore,wedetectedthediliveryofNO,theninvestigatedtheinterrelationbetweenCav-1,perturbedshearstressandNO.Cellswereinoculatedtotheflowchannel,andthenexposedtodisturbedshearstress(about40dynes/cm2).Cellsundershearstresswereallowedtogrowfor6hours,12hours,24hoursand48hours,whileculturemediawascollectedforinvestigatingNO,then these cells were processed directly for immunofluorescence staining withSABC-FITC and compared with cells under resting state.At the same time，theexpression of Caveolin-1 genewasexaminedbyRT-PCR.Inourresearch,wegotdifferentresultswithcellsculturedunderlaminarflowshearstress.Cellsdisplayedellipseunderdisturbedshearstress,andCaveolin-1didnotmovetowardtheupstreamedgeofthecell,butmovedtowardtheedgeofthecell,andexpressionofCaveolin-1geneinECshowedasignificantdecreaseabout40%afterexposuretoshearstressfor48hours.ThereleaseofNOwasgraduallydecreasedwhencellswereallowedtogrow6hours,12hours,24hours,48hours.Whencellswereallowedtogrow for48 hours,the releaseof NOshowed asignificant decrease about30%.Theresultsshowedthatdis