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无菌培训-关于菌种鉴定系统的介绍

关于菌种 鉴定系统的介绍 目前,研发中心进行的菌种鉴定的方法主要有两种,分别为利用API鉴定条进行鉴定和利用VITEK 32自动菌种鉴定系统。 这两种鉴定方法的鉴定原理基本相同,其区别为: 1、VITEK 32需要50~60万元的设备投入,而API鉴定条不需要前期投入,在耗材方面每鉴定一株菌均需要50~100元; 2、在使用方法上,前期的菌种纯化是一样的,但VITEK 32是自动进样,每15分钟自动读数,读数后自动给出结果;而API鉴定条需要人工进样,反应结束后人工读数。 3、VITEK 32的鉴定时间要比API的鉴定时间短。 下面将分别介绍这两种鉴定方法 一、VITEK 32菌种鉴定系统的简介 VITEK 32自动化微生物分析仪由 充填机/读取器/恒温器、电脑主机及打印机组成。充填机三分钟内把样本注入试验卡中及人工封口;读取器/恒温箱可同时容纳32个可反应卡,自动恒定培养温度,每小时读取每张卡内反应变化。电脑主机负责分析存储资料、系统的操作及分析程式的运作。 可鉴定环境、原料及产品分离培养出的微生物 主要鉴定菌种包括: 肠杆菌科 、非发酵G(-)杆菌 、葡萄球菌 、链球菌 、 酵母菌 、厌氧菌 、奈瑟氏菌及嗜血杆菌 、芽孢菌 1、工作原理: VITEK试卡的反应池内含风干底物(培养介质)。试卡由标准浓度菌液充填,然后放入测试槽内,读取器每小时量度卡片内样本在培养介质内生长变化值,与数据库中的数据进行比较分析,达到系统预设的阈值时,自动报告结果,直至最后结果打印出来。 2、主要卡片的种类及其可鉴定的微生物种类 GNI+:革兰氏阴性杆菌鉴定 (1)革兰氏阴性杆菌鉴定(肠杆菌科Enterobacteriaceae) (2)非发酵革兰氏阴性杆菌鉴定:氧化酶阳性(假单胞菌属Pseudomonas) (3)发酵革兰氏阴性杆菌鉴定:氧化酶阳性(弧菌科Vibrionaceae) NFC:氧化酶阳性革兰氏阴性杆菌鉴定 (1)鉴定非发酵革兰氏阴性杆菌:根据对某些化学底物作为唯一碳源的的同化作用(利用)鉴定用生化反应鉴定效果不好的细菌。 (2)对GNI鉴定卡的主要补充测定:可鉴定没有合适鉴定卡的菌或用GNI+鉴定卡鉴定不了的菌。 (3)专门用于非临床的细菌鉴定的新产品:包括环境菌株的数据库,适用于非临床,有补充实验资料(SRF)。 GPI:革兰氏阳性非芽孢杆菌鉴定 (1)?革兰氏阳性球菌:葡萄球菌,链球菌 (2)李斯特氏菌 (Listeria) 和棒杆菌 (Corynebacterium) BAC:革兰氏阳性芽孢杆菌鉴定: (1)革兰氏阳性杆菌的鉴定:中温和高温芽孢菌 (2)专门对工业微生物新发展的产品 (有补充实验资料) ANI:厌氧菌鉴定: (1)厌氧和微好氧细菌(革兰氏阳性和阴性)鉴定:放线菌 (Actinomyces )、拟杆菌 (Bacteroides )、双歧杆菌(Bifidobacterium species) 、梭菌 (Clostridium )、棒杆菌(Corynebacterium )、真杆菌(Eubacterium ) (2)乳酸菌鉴定:乳杆菌(Lactobacillus )、梭杆菌(Fusobacterium )、消化链球菌(Peptostreptococcus )、单胞菌(Porphyromonas ) (3)?有补充实验资料(SRF),可用于微球菌的鉴定 YBC:酵母菌鉴定: 基于碳水化合物同化作用的酵母菌鉴定(如:白色念珠菌) NHI:嗜血杆菌及奈瑟氏菌鉴定 EPS:肠道致病菌推测性鉴定 BIO:水中微生物计数 二、API鉴定条  A P I 鉴定系统是由法国生物- 梅里埃公司生产的细菌数值分类分析鉴定系统。该系统品种齐全, 包括的范围广, 鉴定的能力强, 数据库在不断地完善和补充, 目前约有1000 种生化反应, 可鉴定的细菌大于550 种。是世界范围内应用最广、种类最多、最受微生物学家推崇的国际标准化产品。 A P I 系统用于细菌鉴定的品种有15 种, 分别有相应的数据库。数据库由细菌条目( taxa) 组成, 每个条目可能因情况的不同代表细菌的种、细菌的菌属、细菌的生物型。鉴定主要依据A P I 试剂条的生化反应结果将一种细菌与其它细菌相鉴别, 并用% id (鉴定百分率) 表示每种细菌的可能性。 1、A P I 鉴定系统的组成 A P I 鉴定系统的主要部分是A P I 试剂条及检索工具,此外有些反应

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