2019版 课时分层集训37 微生物的培养与应用.docVIP

课时分层集训(三十七)　微生物的培养与应用 (建议用时：45分钟) (对应学生用书第336页) A组　基础达标 1．(2018·银川一中高三模拟)金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。下面是某研究小组测定自来水中金黄色葡萄球菌浓度的实验操作。请回答下列问题： (1)金黄色葡萄球菌的培养基为7.5% NaCl牛肉膏蛋白胨培养基，根据实验目的应选择________(填“固体”或“液体”)培养基，培养基中加入7.5% NaCl的作用是 ________________________________________________________________ _______________________________________________________________。 (2)在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液，以防止________________。血平板在使用前，需置于恒温培养箱中适宜温度下培养一段时间的目的是__________________________。 (3)取10 mL自来水样，加入________稀释成10－1的自来水样，依次操作，制作稀释10－2、10－3、10－4的自来水样。 (4)将0.1 mL 10－1～10－4的四个稀释样液，分别接种到4组(每组3个)血平板上的方法是______________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现________。若在10－3组的3个血平板上，金黄色葡萄球菌菌落数分别为42、38和37，则每升自来水中的活菌数约为__________个。 [解析]　(1)金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，据此原理可对金黄色葡萄球菌进行筛选，因此应选择固体培养基。金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，用7.5% NaCl牛肉膏蛋白胨培养基培养金黄色葡萄球菌时，培养基中加入的7.5% NaCl，不影响金黄色葡萄球菌的生长，但同时可抑制其他菌的生长，因此利于金黄色葡萄球菌的筛选。 (2)高温会破坏血细胞，因此为了防止高温破坏血细胞，在制作血平板时需等平板冷却后，方可加入血液。血平板在使用前，需置于恒温培养箱中适宜温度下培养一段时间的目的是：检测血平板是否符合无菌要求。 (3)取10 mL自来水样，加入90 mL无菌水稀释成10－1的自来水样，依次操作，制作稀释10－2、10－3、10－4的自来水样。 (4)将稀释的样液接种到血平板上进行微生物的纯化培养，所采用的接种方法是涂布(平板)法。金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，因此在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现透明圈(溶血圈)。依题意：血平板上生长的平均菌落数＝(42＋38＋37)÷3＝39个，则1 mL自来水中的活菌数约为(C÷V)×M＝(39÷0.1)×1000＝3.9×105个，每升自来水中的活菌数为＝3.9×105×103个＝3.9×108个。 [答案]　(1)固体　利于金黄色葡萄球菌的筛选 (2)高温破坏血细胞　检测血平板是否符合无菌要求 (3)90 mL无菌水　(4)涂布(平板)法　透明圈(溶血圈)　3.9×108 2．苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据如图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题： 【导学号 (1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作为碳源的有________。 (2)将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加________。 (3)如图为连续划线法示意图，在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。 (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________。 管号 1 2 3 4 5 6 苯酚浓度(mg/L)1 如果废水为50 mg/L苯酚溶液，降解后约有21%的苯酚残留，则需将残留液稀释________(填序号：①5　②10　③20)倍后，再进行比色。 [解析]　(1)酚降解菌富集培养基中的蛋白胨和苯酚为酚降解菌生长提供碳源。(2)转接的目的之一是富集降解苯酚能力强的酚降解菌，随转接次数增多，培养基中的苯酚含量应逐渐增加。若平板中菌落过于密集，则需进一步稀释，降低菌体密度后再涂布培养，以便于菌落分离与计数。制备平