《第一节 工具酶的发现和基…课件》高中生物浙科版选修3 现代生物科技专题.ppt

美国墨西哥湾原油泄漏事件 —史上最严重的生态灾难 石油中的烃类物质难以降解，该如何解决？ 从短期看，原油中的一些物质可能引发皮肤不适、头疼、晕眩、恶心、眼睛灼热、呼吸不畅、记忆力下降等急性症状。 从长期看，泄露原油会进入海洋生态食物链，尤其是墨西哥湾食物链将承受一笔“污染遗产” ，进而对人体健康构成危害。 危害 利用基因工程将4种能吃浮油的假单胞杆菌的基因拼接起来，合成一种假单胞杆菌种，即超级细菌。它能分解各种石油烃，消除浮油的效率高，只需几小时就能除掉自然菌种需几年才能消除的原油污染。 20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 1.概念： 2.原理： 基因重组 3.优点： ①增加了生物变异的范围，实现种间遗传物质的交换 ②针对性更强（或者说能按自己的意愿、定向改变生物性状），引起的是定向的变异。 缺点： 技术复杂 关于基因工程，你知道多少？ 又叫做重组DNA技术。是指按照人们的意愿,在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 4.实例 超级细菌 如何利用基因工程获得这种超级细菌呢？ 1.寻找“吃油”基因，获得“吃油”基因 限制性核酸内切酶 ——切割DNA分子的手术刀 能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶。 含义： 作用部位： 作用特点： 磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键 有特异性。即一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。 EcoRI A A G T T C C T T A A G C T T A A G G A A T T C 识别GAATTC序列，并在G和A之间切开 限制酶在切断DNA时，可在切口处带有几个伸出的核苷酸，他们之间碱基正好互补配对，因此称这些片断为粘性末端。 思考： 要想分离“吃油”基因（大括号所表示的）必须要用EcoRI限制性核酸内切酶切几个切口？可产生几个粘性末端？ 切两个切口，产生四个粘性末端。 如果把来自假单胞杆菌的DNA片段和来自某菌种的DNA片段用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的粘性末端。 某菌种的吃油基因片段 A A G T T C C T T A A G A A G T T C C T T A A G 2. 重组DNA分子 基因工程载体 ——运载外源DNA进入宿主细胞的“车子” 质粒（最常用）、噬菌体和某些动植物病毒 种类： 条件： （1）能在宿主细胞内自我复制并稳定地保存 （2）有多个限制性核酸内切酶切点，可使外源基因插入其中 （3）具有某些遗传标记基因（如抗生素抗性基因），以便进行筛选 （4）对受体细胞无害 （5）分子大小应适合，以便提取和在体外进行 操作。 质 粒 存在于大肠杆菌等细菌拟核之外 存在： 本质： 特点： 染色体外的小型的双链环状DNA分子。 能自我复制； 常具有抗生素抗性基因(标记基因)； 其存在对宿主细胞无影响。 有切割位点 两条链的骨架部分，形成磷酸二酯键 连接部位： 具有末端碱基互补的两个DNA片段连接起来，形成重组DNA分子。 作用： C G G C C G T T A A A A T T G C T A T A DNA连接酶 T A A T C G T A T A A T A T G C T A T A 含“吃油”基因的DNA片段 质粒载体片段 2. 重组DNA分子 活动：以四人为一小组，把“吃油”基因和质粒组合形成重组DNA分子 注： EcoRI限制性核酸内切酶识别GAATTC序列，切割位点在G和A之间； A A G T T C C T T A A G A A G T T C C T T A A G T A A T C G T A T A A T A T G C T A T A EcoRI A A T T G C T A T A DNA连接酶 含“吃油”基因的DNA片段 质粒载体片段 T A A A T T G C T A T A A T C G T T A A A G A T T G C A T C T A A A T T G C T A T A A A T T G C T A A A G T T C C T T A A G A A G T T C C T T A A G EcoRI T A A T C G T T A A A G A T T G C A T C 【拓展练习】基因工程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶Ⅰ的识别序列和切点是— G↓GATCC—，限制性核酸内切酶Ⅱ的识别序列和切点