毕业论文--ELISA法优化提取大米中黄曲霉素B1的研究.docVIP

山东农业大学 毕 业 论 文 题目： ELISA法优化提取大米中黄曲霉毒素B1的研究 Optimization of the Extraction Method of Aflatoxin B1 in Rice in ELISA 学 院 食品科学与工程学院 专业班级 食品质量与安全*班 届 次 2012届 学生姓名 XXX 学 号 2008**** 指导教师 二O一二 年 六 月 十 日 目录 摘 要： 5 1 前言 7 1.1 黄曲霉毒素的介绍 8 1.1.1 黄曲霉毒素的发现历史 8 1.1.2 黄曲霉菌种及分布 9 1.1.3 黄曲霉毒素的种类和结构 9 1.1.4 黄曲霉毒素的一般理化性质 9 1.1.5 黄曲霉毒素的毒性 10 1.1.6 黄曲霉毒素与动物疾病 10 1.1.7 黄曲霉毒素与人类的健康 11 1.2 黄曲霉毒素提取方法介绍 11 1.2.1 薄层色谱法TLC 法 11 1.2. 2 溴化荧光分光光度计法SFB 法 12 1.2.3 竞争性酶联免疫吸附法ELISA 12 1.2.4 高效液相色谱法(HPLC) 13 1.2.5 微柱筛选法 13 1.2.6 分析方法的选择 14 1.3 本实验的研究内容及意义 14 2 材料与方法 15 2.1 材料 15 2.2 主要试剂 15 2.3 主要仪器设备 15 2.4 试验方法 16 2.4.1 样品前处理 16 2.4.2 样品提取方法筛选 16 2.5 ELISA方法的检测步骤 17 2.5.1 试剂的准备 17 2.5.2 抗原抗体反应 17 2.5.3 显色 17 2.5.4 测定 17 2.6 AFB1标准曲线 18 2.7 各因素对提取回收率的影响 18 2.7.1 超声波提取时间对AFB1提取效果的影响 18 2.7.2 溶剂及溶剂比例对AFB1提取效果的影响 18 2.7.3 液料比例对AFB1提取效果的影响 19 3 实验结果与分析 20 3.1 目视法测定 20 3.2 标准曲线的绘制 20 3.3 原样品中AFB1含量的计算 21 3.4 振荡处理与超声波处理对比 21 3.5 黄曲霉毒素含量和回收率的计算 22 3.5.1 样品AFB1含量计算方法 22 3.5.2 样品AFB1回收率计算方法 22 3.6 不同提取方法对大米样品加标回收率的影响 23 3.6.1 不同超声波处理时间对大米样品加标回收率的影响 23 3.6.2 甲醇及其与水的比例对大米样品加标回收率的影响 24 3.6.3 丙酮及其与水的比例对大米样品加标回收率的影响 25 3.6.4 不同液料比对大米样品加标回收率的影响 25 4 结论 26 参考文献 28 致谢： 31 CONTENTS Abstract 5 1 Foreword 7 1.1 The introduction of AF 8 1.1.1 The history of AF 8 1.1.2 The species and distribution of aspergillus 9 1.1.3 The varieties and structures of AF 9 1.1.4 The Physical and Chemical properties of AF 9 1.1.5 The toxicity of AF 10 1.1.6 Animal diseases and AF 10 1.1.7 Human health and AF 11 1.2 The introduction of extracting AF 11 1.2.1 Thin-Layer Chromatography(TLC) 11 1.2.2 SFB 12 1.2.3 ELISA 12 1.2.4 HPLC 13 1.2.5 Micro-column screening Method 13 1.2.6 The selection of analytical method 14 1.3 The content and significance of this study 14 2 Materials and methods 15 2.1 Materials 15 2.2 The main reagents 15 2.3 The equipments 15 2.4 Test method 16 2.4.1 Sample pretreatment 16 2.4.2 The screening of treatment methods 16 2.5 T