2 细菌学检验基本技术（6h）.pptVIP

第二章 细菌学检验基本技术 温红玲 第一节 样本的采集与送检 临床样本 食品卫生样本 化妆品样本 生活饮用水样本 消毒及卫生用品 空气 一、临床样本的采集与送检 （一）血及骨髓样本的采集 1.采样时间 一般情况下采样应选择在病人发病早期、急性期或症状典型时； 应争取在使用抗菌药物之前采样，对于已用上抗菌药物而病情又不允许停药者，应在下一次用药前采样。 且视病程和病情需要，可在不同时间采样。 如沙门菌感染引起的败血症和肠热症患者在病程的1周～2周内采静脉血，肠热症患者还可在1周～3周内采集骨髓样本。 （一）血及骨髓样本的采集 2.采样部位及频率 增加采样的频率 多个部位采样 如急性败血症采样：可在24h内采血3次或更多次，并可在不同部位，如左、右手背或颈部采血样。 （一）血及骨髓样本的采集 3.样本采集的量 血培养的阳性率与血样本的量直接相关。 一般成人血量为每瓶10ml，婴儿为1ml～2ml，儿童为3ml～5ml； 当怀疑为真菌感染时，应采集双份量，分别作双相培养。 骨髓采集量一般为1ml～2ml。 4.样本的送检 样本立即送到细菌实验室 若不能立即送检时，应将已接种的培养瓶置于温室，切勿置冰箱存放；因某些菌可能在低温下死亡，使培养阳性率下降。 （一）血及骨髓样本的采集 5.注意事项 (1)严格做好采血部位和用具的无菌操作。 (2)样本应同时需氧和厌氧培养。 (3)采集样本的针头、注射器及废弃培养瓶必须经灭菌后才可丢弃。 (4)送检单上应填写所有必须项目及采样时间。 (5)在送检途中若不慎打破培养瓶，应封锁现场，作妥善消毒处理。 （二）尿液样本的采集 1.采样时间 一般应采集晨起第一次尿液送检； 原则上应在使用抗菌药物前采样。 沙门菌感染采样一般在病后2周左右采集尿样本； 钩端螺旋体感染采样一般在感染后第八天（尿症期）以后采集尿样本； 结核分枝杆菌感染采样一般留取晨尿或24h尿的沉渣部分10ml～15ml送检，若为培养，患者应停药1d～2d后采尿样培养。 （二）尿液样本的采集 2.采样方法 一般采集中段尿，先排去前段尿，留取中段尿10ml左右于无菌容器内，立即送检。 也可采集肾盂尿或者用导尿管采尿。 另外，在进行结核分枝杆菌集菌检查时，用集尿法以一清洁容器留取24h尿，取沉渣10 ml～15 ml送检。 3.注意事项 严防杂菌污染，严格无菌操作。 采集到尿样本后应尽快送检，尿液中不得加防腐剂或消毒剂。 （三）粪便样本的采集 1.采样时间 腹泻患者在急性期采样 原则上应在使用抗菌药物之前采集样本 2.采样方法 成型便取异常部分； 液状粪便取絮状物盛于无菌容器内或置于保存液、增菌液中送检 对于排便困难者或不易获得粪便时或对幼儿，可采用直肠拭子采样 对于不能立即送检的样本应放入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油（0.033mol/L PBS与等体积的甘油混合）中运送和保存。 （三）粪便样本的采集 3.注意事项 尽管粪便中含有多种杂菌，但仍应尽量用无菌容器采样。 所采样本应新鲜以便培养和提高检出率；腹泻患者应尽量在急性期（3d内）采样以提高阳性率。 用于厌氧培养的样本应即采即接种厌氧培养基，尽量避免样本与空气接触，应立即送检。 （四）痰及上呼吸道样本的采集 1.采样时间 痰样本采集：以晨间的痰为好，晨痰量最多 采集鼻咽拭子：时间上无严格限制，最好在使用抗菌药物之前采样。 2.采样方法 痰样本采集：自然咳痰法、支气管镜采集法、胃内采痰法、气管穿刺法等；对小儿取痰是以拭子采集。 上呼吸道样本采集：采样前患者应用清水反复漱口，将棉拭子在咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次（应避免接触口腔和舌粘膜），将拭子送检。 （四）痰及上呼吸道样本的采集 3.注意事项 痰样本采集以清晨为佳，采样前应以漱口水充分漱口以减少口腔正常菌群污染。 为防某些菌在外环境中死亡，所采样本应立即送检。作结核分枝杆菌和真菌培养的样本不能及时送检，应4℃保存，以免杂菌生长。 若做结核分枝杆菌检查，痰量需多或留取24h痰液，婴儿应用胃管取痰。 （五）其它临床样本 化脓和创伤样本一般采自感染及伤及部位，以棉拭子、无菌空针或吸管采样； 穿刺液样本一般在使用抗菌药物前以无菌方式穿刺采样； 烧伤部位样本用无菌棉拭子直接在脓汁多的部位采样； 生殖道样本以无菌操作采集有分泌物的部位或腔道内病变部位； 组织样本应根据病变部位，炎症或组织坏死部位，通过手术或内镜采集； 尸体样本应于死后迅速采集，室温保存者于4h内采样，4℃保存者应于20h内采样。 二、食品卫生细菌学检验样本的采集和送检 （一）样本采集原则 必须具有代表性，要防止样本受到外源性污染、样本变质和细菌生长 采样种类可分为大样、中样和小样3种。 大样指一