家兔个体表达系统的建立.pdfVIP

遗 传 学 报，20(2):122131,1993 ActaGeneticaSinica 家兔个体表达系统的建立。 施履吉 郭礼和 倪祖梅 左嘉客 （中国科学院上海细胞生物学研究所，上海 200031) 陆德裕 杜 森 李光三 （中国科学院发育生物学研究所，北京） 徐少甫 李国忠 穆宗尧 杜福良 （江苏农学院，扬州） 陈受宜 劳为德 （中国科学院生物物理研究所，北京） 沈 孝 宙 （中国科学院动物学研究所，北京） 陈秀兰 谭丽玲 （中国科学院遗传学研究所，北京） 将乙肝表面抗原基因及人生长激素基因用微注射法转入家兔受精卵发育成为有整合、有 表达的当代兔，并繁殖出了有外源基因存在、有表达的子代兔。转基因所用的质粒是含 （1)乙 肝病毒表面抗原S基因与小鼠MT启动子的 pMTSA,(2）乙肝病毒核心抗原基因和乙肝病 毒S基因启动子的 pHBV,.。和 3（）含有人生长激素基因 SV40启动子和小鼠MT 启动子的 pSMGH。质粒均切成线性分子后再注射。从757个微注射并移植的受精卵经发育娩出得 101 只仔兔。其中有57％具有整合的微注射基因。用ELISA法侧出28只转基因兔内有8只的血 清中有表达的乙肝病毒表面抗原，占总数约 30%。转基因兔与转基因兔和其与正常兔交配获 得的子代中有83％含有转基因，有15％在血清中可测出乙型肝炎表面抗原。对转人人生长激 素基因的兔也作了整合和表达的检测。 关键词 转基因兔，乙肝表面抗原基因，生长激素基因，微注射，整合，表达 生物技术的一个重要方面是高等生物育种。当前，常规育种虽然行之有效，但有局限 性。因为，(1)常规育种主要靠有性杂交，但大多数物种间不能进行有性杂交，这即是所谓 的种IA壁垒；这使常规育种不能利用许多自然界中的有利基因来改良一特定的物种。(2) 常规育种对多因子性状的基因缺少选择、分离和组合的有效手段，像许多有经济价值的性 状 如（生长优势、抗病等）都是多因子的。(3）用常规育种来培育一个新品种常需5个世代 以上，有些高等经济生物的性成熟常需4年或更长，育成一个新品种，需要二十年以上。只 本文于1991年5月20日收到。 1)参加本工作的还有祁慧霖、王敏、朱光、成国祥、王立康、成勇、王捍东、吴维芬和余碧玉等同志。在此hikM李载 平教授头验室协助工作并供给部分乙肝表面抗原基因。 2期 施履吉等：家兔个体表达系统的建立 123 有缩短育种周期才能适应今后的需求。近年来随着高等生物个体表达系统 转（基因动植 物）的发展，今后可望通过这套系统将目的基因引人个体，对多因子性状的基因进行选择、 分离和组合而加以利用，从而打破种间壁垒和避免育种期过长的弊病。这对改进育种方 法方面有着广泛而深远的意义；这种系统的建立对高等动植物个体形成中基因的时空表 达程序等问题的研究也有着重要意义。 从基因工程来说，转基因个体尤其是大家畜的转基因个体可以代替常规的生物反应 器及其相应的工艺，从而大大减低生产成本。如乳牛中酪蛋白基因的产物，每年每头可达 150公斤以上。 建立哺乳动物的个体表达系统 转（基因个体）是一个复杂的技术工艺体系，包括排卵 的诱导和控制、受体的控制和同步化、受精卵的收集和检测、外源基因的加工和扩增 克（ 降）、卵原核的鉴定、雄性原核内基因的注}-}jI转基因受精卵在假母中的移植、在转基因个 体中外源基因整合及表达的检测等。 Gordon等4〔1980年首次将外源基因转人小鼠受 精卵并获得成活个体。本工作的目的是建立一个家兔的个体表达系统，以探讨用转基因 动物个体