溶剂回流法提取茶多酚精选.docVIP

项目名称：溶剂回流法提取茶多酚 【工作汇报】 溶剂回流法提取茶多酚 操作者姓名： 王岚 班级 生物技术102 专业 生物技术 前言 1、实训的背景、目的和意义： 实训的背景： 茶多酚（Tea Polyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。心血管疾病提高人体的综合免疫能力其它保健治疗功效有效成份提取率 因为采用了高效的连续逆流提取工艺，浓度梯度大、有效成分提尽率大；用有效成份提取率可提高10%～30%(对比实验数据分析)。 回流提取法通过冷凝装置，回流溶剂，节约溶剂用量，而且回流提取的材料用量少些索氏提取和一般回流的过程，一般的回流只是为了防止液体挥发，回流下来的液体都直接回到瓶内继续加热了；而索氏提取回流下来的液体会先集中到样品室置里面，便于回收，然后到一定量后，通过虹吸作用再回流到下面的瓶里面继续加热。这样，如果测脂肪的话，开始的时候，样品室里面的乙醚或者石油醚会对样品有浸泡作用，在之后的回收过程中，因为样品的脂肪没有了，所以样品室中的乙醚就是挥发出来的纯乙醚了，就可以回收乙醚，防止污染空气与浪费，而提取出来的油脂则在下面的回流瓶里面，蒸干后通过差值测得脂肪的质量，便于脂肪含量的计算。GB/T 8313-2008 3、实训操作关键技能 （1）茶叶与乙醇加入圆底烧瓶的次序，建议先适当预热乙醇，倒出1/15体积后再投入茶叶。 提取装置整体搭建美观，安装顺序从下往上，若水龙头不多，可用乳胶管在冷凝管中封满凉水冷凝。 回流提取时间从提取溶剂沸腾回流开始计时。 第二次加入乙醇体积不用再按液固比为12:1（ml/g)b比例，滤出多少补充多少，但务必尽量滤尽。 过滤好趁热进行，量取体积等到滤液冷却后。 （6）按顺序拆除实验器具，洁净并放回原处，茶渣丢进垃圾桶。 材料及方法 实训材料及配制、预处理技术 （1）茶多酚的提取 实训材料准备：碾碎的绿茶、乙醇、恒温电热套、圆底烧瓶（磨口）、球形冷凝器、铁架台、酒精计、漏斗、滤布、烧杯、量筒、玻璃等。 配置：乙醇溶液的配置 预处理：将茶叶粉碎（不要粉的很碎，会影响提取效率） （2）茶多酚的测定 材料：分光光度仪、蒸馏水、酒石酸亚铁溶液、缓冲溶液ph=7.5 配置： ①1/15M的Na2HPO4溶液：称取Na2HPO4.2H2O 11.876 克，加水溶解并稀释至1 L。 ②1/15M的KH2PO4溶液：称取经110℃ 烘干2 h的KH2PO4 9.078克，加水溶解并稀释至1 L。 ③取溶液（1）85 ml和溶液（2）15 ml混匀。 预处理：将分光光度计打开，设置波长为540nm，预热20分钟。 2、实验技术流程路线： （1）秤取茶叶50克－→揉碎－→放到圆底烧瓶中－→加入240ml乙醇－→在恒温水浴中回流提取45分钟－→趁热过滤－→将滤渣放回到圆底烧瓶，加入等滤液体积的65%乙醇－→恒温回流提取30分钟－→趁热过滤－→合并滤液－→冷却后量体积－→标识贮藏备用 （2）吸取样液1ml－→25ml容量瓶－→4ml蒸馏水－→5ml酒石酸亚铁（充分混合）－→加ph7.5的缓冲溶液至刻度－→10mm比色皿，在波长540nm处，以空白溶液作对照，测定吸光度（A） 计算：茶多酚%＝(A*1.957*2)÷1000×[L1÷﹙L2×M0×m）]×100 L1-----测量总量 L2---测定时的用液量 M0-----试样的质量 m----试样干物质质量 A-----吸光度 1.957----用10nm比色杯，当A=0.5时，每毫升茶多酚相当于1.957 结果与分析 1、实验结果： 吸光度：（1）A1=0.246 A2=0.293 A3=0.294 A平均=0.2078 茶多酚%=﹙0.278×1.957×2﹚／1000×﹙268／0·04×20.1×95%﹚≈38.1% 2、实验结果分析： 实验成功，最佳吸光度是在0.2---o.8之间，我们所测得的最终吸光度分别为0.2078,在最佳吸光度值之间。 3、讨论及建议： ①、我们此次采用溶剂回流提取装置提取茶多酚，其好处在于回流提取法是用乙醇等易挥发的有机溶剂提取原料成分，将浸出液加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后又被冷却，重复流回浸出容器中浸提原料， 这样周而复始，直至有效成分回流提取完全的方法。 回流法提取液在蒸发锅中受热时间较长，故不使用于受热易破坏的原料成分的浸出。而索式提取法是从固体物质中萃取化合物的一种方法是，用溶剂将固体长期浸润而将所需 要的物质浸出来，即长期浸出法。此法花费时间长．溶剂用量大、效率不高。 ②、溶剂提取法的优点