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流式细胞仪的主要部件-西南医科大学附属医院
技 巧
西南医科大学附属医院
流式细胞实验室
分析型
分选型
主要内容
1 流式基本原理和术语
实用!
2 上机分析前技术要点
3 结果分析
Part 1 流式基本原理和术语
基本概念
流式细胞仪: (Flow Cytometer)
集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算
机技术、细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的
一种新型高科技仪器。
流式细胞术(Flow Cytometry ,FCM ):利用流式细胞仪对
处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、
快速定量分析,同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术
流式细胞仪特点
单细胞悬液
或生物颗粒
分析速度高
当代最先进的细胞定量
多参数 分析技术
精度高
流式细胞仪检测范围
细胞大小 特异性抗原
细胞粒度 (细胞表面/胞浆/核)
细 细胞表面面积 细 细胞内细胞因子
胞 胞 细胞活性
结 核浆比例 功 酶活性
构 能
DNA含量与细胞周期 激素结合位点
细胞受体
RNA含量
蛋白质含量
流式细胞仪的主要部件
• 光学系统
激光光源
光收集系统
• 液流系统
流动室
液流驱动系统
• 电子系统
光电转换
数据处理系统
• 细胞分选系统
原理
• 液流系统:单细胞
• 光学系统:光信号(荧光或散射光)
• 光电转换系统:信号放大
• 计算机系统:数据处理
激光光源
单波长、高强度、高稳定性
多采用氩离子激光器或氦氖激光器
一般选配2-4根激光,488nm 、633nm和355nm、407nmUV激光
最多检测13个荧光参数
基本术语
空白对照 同型对照 阴性对照
空白样本 已知的阴性
不加试剂 样本
基本术语
补 偿 设 门 关联
排除不同荧光 选择要分析的 建立门与分析
之间的相互干 细胞群。 指标的层次关
扰。
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