菌种的管理和使用.pptVIP

菌种的使用过程 —储备管的制备 申请 申请 储备管的制备 经过修复后 的原始菌种可以制备成储备管进行储存，每个冻干菌种恢复后可以制成数个储备管和一支质控管，储备管的数量依据效期及使用量来定。 按照10%的比例加入甘油做为防冻剂。 摇匀后进行分装，每支一般1-2ml。 按顺序进行编号，最后一支做为质控管进行质量控制，即进行相应的鉴别。（冷冻至少24小时后进行鉴别） 贴标签进行标识（标签参考前面，但需要有顺序号，保证每支菌种管标签的唯一性。） 低于-50℃进行冷冻保藏，效期根据实验室验证的时间来定，一般可以保存3年。 菌种的使用过程 —菌悬液的制备 申请 申请 菌悬液的制备 储备管的取用—按照顺序进行取用，保证取用的无误性。 储备管融化；商业购买的储备管按照说明进行接种 恢复: 细菌接种TSA30-35℃培养18-24h；真菌接种SDA，酵母20-25 ℃培养24-48h；霉菌20-25 ℃培养7-14天（用0.05％Tween80胨水稀释后接种） 菌液的制备：细菌和酵母菌用氯化钠胨水进行稀释；霉菌用0.05％Tween80胨水稀释） 标识（唯一性，可以追溯） 效期：按照药典要求，菌悬液在室温下放置应在2 小时内使用，若保存在2～8℃可在24 小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在2～8℃，在验证过的贮存期内使用。 菌种的使用 申请 申请 质量控制 质量控制贯穿于整个传代过程，只要有传代动作发生，则必须有质量控 制过程。 所有的过程均需要有记录。 菌种编码 编码必须具有唯一性，且可以追溯。例如： 冻干菌种编码ATCC8739/01----ATCC8739表示菌种编码；01表示接收的第一支。 储备管SV8739/01/18/1----SV代表储备管，18代表第18支储备管，1代表传代代数。 菌悬液编码D8739/01/18/1-5---5代表稀释度示2009年5月1日制备。 菌种的使用 申请 申请 菌种传代流程 S1 S2 S3 S72 QC CV Cycle 1储备管 第一代 冻存（零下50℃） WS1 WS2 WS3 WS72 鉴别 S1 S2 S3 S72 QC WS1 WS2 WS3 WS72 鉴别 工作菌悬液 第二代 冷藏（2~8℃） Cycle 2储备管 第二代 冻存（零下50℃） 工作菌悬液 第三代 冷藏（2~8℃） TSB   冻干菌种 BACK 文件和记录 申请 申请 文件 需要有详细的贴合实际的SOP，但必须保证符合相应法规要求。 记录 菌种的接收、储存、取用及恢复记录 储备管的制备、储存及 取用记录 工作菌悬液的配制、储存、稀释及取用记录 QA Thank you！ * * * * * * 菌种的使用和管理 马英英 2009.05.20 菌种的使用过程 文件及记录 QA 内容提要： 菌种的质量控制和鉴定 菌种保藏 菌种保藏 目的：保证检验中有准备好的菌悬液可以使用。 一般需要使用菌悬液的试验如下： 防腐剂效能试验 方法验证 培养基质量控制 鉴别系统的质量控制 阳性对照 菌种保藏 菌种保藏方法 不同的微生物受不同的环境条件影响其特性会发生改变，故需要确保菌种在合适的储存条件下保藏。 药典要求:试验用菌种应采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。 一般的保藏方式如下： 冷藏 冷冻 冻干保藏 菌种保藏 冷藏 在2-8℃的冰箱保藏，是一种短期的有效的短期储藏方法。 工作菌悬液和稀释液均用此方法保藏，储藏时间需要进行相关的验证，但必须符合法规要求。 保藏方式可以选择如下形式： 肉汤---TSB 、胨水等 穿刺--- 一般用于厌氧菌的保藏 斜面---TSA 、SDA 划平板--- 一般为了得到单颗菌落 菌种保藏 冷冻 在低温下保藏，需要加入保护剂，例如甘油，可以减少冷冻对菌种的伤害，一般在低于-50℃冰箱内保藏，是一种有效的长期储藏方法。 储藏时间同样需要进行相关的验证。 菌种保藏 冻干法保藏 是一种长期保藏菌种的方法，一般情况下