翻译过程及后加工.pptVIP

翻译过程 一 多聚核糖体 二 肽链的合成 三 真核生物翻译与原核生物翻译的区别 四 蛋白质前体的加工与折叠 五 蛋白质的转运机制 多聚核糖体(polysome)  ?概念 核糖体在细胞内并不是单个独立地执行功能，而是由多个甚至几十个核糖体串连在一条mRNA分子上高效地进行肽链的合成，这种具有特殊功能与形态结构的核糖体与mRNA的聚合体称为多聚核糖体。 ? ?多聚核糖体的生物学意义 ?细胞内各种多肽的合成，不论其分子量的大小或是mRNA的长短如何，单位时间内所合成的多肽分子数目都大体相等。 ?以多聚核糖体的形式进行多肽合成，对mRNA的利用及对其浓度的调控更为经济和有效。 细菌中转录与翻译是偶联在一起的 在真核生物中，mRNA是在细胞核中合成的，而蛋白质合成发生在细胞质中，是通过细胞质中游离的核糖体，或是通过与内质网相连的核糖体合成的 肽链的合成 蛋白质的合成过程比较复杂，由核糖体、mRNA和tRNA三者密切配合共同完成，一般要经过肽链合成的起始、延伸和终止三个阶段的反应，才能转译出多肽产物。 翻译的起始 翻译起始又可被分成三步： 第一步，30S小亚基首先与翻译起始因子IF-1，IF-2结合，再在SD序列的帮助下与mRNA模板结合。 第二步，在IF-2和GTP的帮助下，fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。 第三步，带有tRNA，mRNA，三个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。 肽链的延伸 分为三步： 1）AA-tRNA与核糖体结合 2）肽键的生成 3）移位 肽链的终止 肽链的延伸过程中，当终止密码子UAA、UAG或UGA出现在核糖体的A位时，没有相应的AA-tRNA能与之结合，而释放因子能识别这些密码子并与之结合，水解P位上多肽链与tRNA之间的二酯键。接着，新生的肽链和tRNA从核糖体上释放，核糖体大、小亚基解体，蛋白质合成结束。 真核生物翻译与原核生物翻译的区别 起始特点：a.核蛋白体是80S;b.起始因子种类多；c.起始tRNA的Met不需甲酰化;d.mRNA的5’帽子和3’poly A尾结构与mRNA在核蛋白体就位有关；e.起始tRNA先与核蛋白体小亚基结合，然后再结合mRNA 延伸特点：真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似，但有不同的反应体系和延长因子。另外，真核细胞核蛋白体没有E位，转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 终止特点：原核生物有三种释放因子：RF-1，RF-2，RF-3 ；而真核生物释放因子只有一种：eRF 真核生物翻译起始因子 延伸因子 蛋白质前体的加工与折叠 蛋白质前体的加工 1 N端fMet或Met的切除 2 二硫键的形成 3 切除新生肽中非功能片段 4 特定氨基酸的修饰 5 亚基的聚合 6 辅基结合 二 蛋白质前体的折叠 二硫键的形成 新生蛋白质经蛋白酶切割后变成有功能的成熟蛋白质。 左：新生蛋白质在去掉N端一部分残基后变成有功能的蛋白质； 右：某些病毒（反转录病毒）可合成无活性的多聚蛋白质，经蛋白酶切割后成为有功能成熟蛋白。 前胰岛素原蛋白翻译后成熟过程示意图 （2）越膜后的加工 a、内质网中滞留 b、内质网中加工： 折叠、糖基化等 c、加工后的定位和分泌 （蛋白中的信号补丁） * * IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi 起始过程消耗1个GTP。 Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP U A G 5 3 RF COO- 促进核蛋白体分离成大小亚基 eIF-6 促进各种起始因子从小亚基解离，进而结合大亚基 eIF-5 eIF-4F复合物成分，结合eIF-4E和PAB eIF-4G eIF-4F复合物成分，结合mRNA 5’帽子 eIF-4E 促进mRNA扫描定位起始AUG eIF-4B eIF-4F复合物成分，有解螺旋酶活性，促进mRNA结合小亚基 eIF-4A 促进大小亚基分离 eIF-2B, eIF-3 促进起始tRNA与小亚基结合 eIF-2 生物功能 起始因子 EF-2 有转位酶活性，促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位，促进卸载tRNA释放 EFG EF-1-βγ 调节亚基 EF-Ts EF-1-α 促进氨基酰-tRNA进入A位，结合分解GTP EF-Tu 对应真核延长因子 生物功能 原核延长因子 二 蛋白质前体的折叠 A、折叠酶 蛋白质二硫键异构酶（protein disulfide isomerase，PDI) ： 可以识别和水解非正确配对的二硫键，使它们在正确的 半胱氨