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专题4 DNA和蛋白质技术
精做04 DNA的粗提取与鉴定
1.(2015江苏卷)图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是
A. 图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同
B. 图1 中完成过滤之后保留滤液
C. 图2 中完成过滤之后弃去滤液
D. 在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
【答案】BCD
2.回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。
(1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是____。
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应
(2)如图为该实验过程中的一些重要操作示意图。
正确的操作顺序是____________________________________。
上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是__________________和________________。
图A步骤中所用酒精必须经过____________才能使用,该步骤的目的是________________________________________________。
(3)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加________试剂,沸水浴,如果出现________,则该丝状物的主要成分为DNA。
【答案】(1)B
(2)C→B→E→D→A ②加速血细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出 充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的DNA
(3)二苯胺 蓝色
但是不能水解DNA,蛋白质不能耐受较高温度,DNA能耐受较高温度,洗涤剂能瓦解细胞膜,但是对DNA没有影响;④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。分析选项可知,B正确。(2)①根据DNA的粗提取和鉴定步骤:加入蒸馏水,破碎细胞→过滤,获取含DNA的滤液,去除滤液中杂质,DNA的析出,鉴定。所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A。②C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂,E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低,析出DNA。③DNA不溶于酒精,95%的冷酒精凝集效果最佳,所以A步骤中所用酒精必须经过充分预冷才能使用,以便除去溶于酒精的杂质,提取含杂质较少(或较纯净)的DNA。(3)DNA鉴定用二苯胺水浴加热,呈蓝色。
3.下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序,请分析回答下列问题:
(1)步骤一中,向鸡血细胞液中加入________并搅拌,可使鸡血细胞破裂。
(2)步骤二中,过滤后收集含有DNA的___________________。
(3)步骤三、四的操作原理是_____________________________,步骤四通过向溶液中加入________调节NaCl溶液的物质的量浓度,为________mol/L时,DNA将会析出,过滤去除溶液中的杂质。
(4)步骤七:向步骤六过滤后的________中,加入等体积的冷却的________,静置2~3 min,溶液中会出现________色丝状物,这就是粗提取的DNA
(5)步骤八:DNA遇________试剂,沸水浴5 min,冷却后,溶液呈________色。
【答案】(1)蒸馏水
(2)滤液
(3)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质 蒸馏水 0.14 (4)滤液 酒精 白
(5)二苯胺 蓝
(3)去除滤液中的杂质:方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA;方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。(4)DNA的析出与鉴定:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液,静置2~3 min,溶液中会出现白色丝状物,这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分;取两支20mL的试管,各加入物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液5mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。混合均匀后,将试管置于沸水中加热5 min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
【点睛】解答本题的关键是掌握DNA粗提取、提纯和鉴定的原理,明确DNA鉴定时需要水浴加热。
.生物兴趣小组以苹果为材料开展细胞中DNA含量测定研究,主要实验流程如下图,其中SDS(十二烷基硫酸钠)具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白
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